تولید سلول های تولید کننده انسولین از سلول های پیش ساز مزانشیمی C3H10T1/2

تاریخ انتشار: دوشنبه 11 اسفند 1393 | امتیاز: Article Rating

سلول های بنیادی مزانشیمی ((MSC به عنوان  یک منبع جذاب برای تولید سلول های β قابل پیوند گزارش شده اند. یک دودمان سلول پیش ساز مزانشیم جنینی موش ، C3H10T1/2 ، به دلیل پتانسیل تمایزچند رده ای به عنوان مدلی برای سلول های بنیادی مزانشیمی شناخته شده است. هدف از این مطالعه بررسی این بود که آیا سلول های C3H10T1/2  دارای پتانسیل تمایز به سلولهای تولید کننده انسولین (IPCs) هستند. در اینجا، ما تمایز invitro سلول های بنیادی مزانشیمی و سلول های   C3H10T1/2 موش را به سلول های IPCs  مورد بررسی و مقایسه قرار دادیم. پس ازاینکه سلولها  تحت تمایز  IPC قرار گرفتند، بیان نشانگرهای تمایزی توسط ایمونوسیتوشیمی ، واکنش رونویسی معکوس زنجیره پلیمراز (RT-PCR)، RT-PCR  کمی (QRT-PCR)  و وسترن بلات شناسایی شد. ترشح انسولین با استفاده از روش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) مورد بررسی قرار گرفت. علاوه براین، این سلول های تمایزیافته به موش دیابتی شده با استرپتوزوتوسین پیوند شدند و عملکرد های بیولوژیک آنها در داخل بدن مورد آزمایش قرار گرفتند. دراین مقاله یک روش 2 مرحله ای برای تولید سلول های IPCs  از سلول های  C3H10T1/2گزارش شد. درشرایط القایی خاص طی 7-8 روز، سلول های C3H10T1/2 تشکیل اسفروئیدهای سه بعدی کروی (SBS) را داده و انسولین ترشح کردند، در حالی که تولید سلول های IPCs  مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی موش نیازمند مدت زمان طولانی تری (بیش از 2 هفته) بود. علاوه براین، این سلول های IPCs  مشتق از سلول های C3H10T1/2 به موش دیابتی تزریق شده و باعث بهبود قند پایه و وزن بدن شده و تست تحمل گلوکز طبیعی را نشان دادند. مطالعه حاضر یک مدل invitro ساده و پایداررا برای بررسی بیشترمکانیزم پایه ای تمایز IPC از سلول های بنیادی و درمان جایگزینی سلول برای دیابت ارائه کرد.

Gene. 2015 Feb 25. pii: S0378-1119(15)00211-5. doi: 10.1016/j.gene.2015.02.061. [Epub ahead of print]

Generation of insulin-producing cells from C3H10T1/2 mesenchymal progenitor cells.

Jian RL1Mao LB1Xu Y1Li XF1Wang FP1Luo XG1Zhou H1He HP1Wang N2Zhang TC3.

 

 

Abstract

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been reported to be an attractive source for the generation of transplantable surrogate β cells. A murine embryonic mesenchymal progenitor cell line C3H10T1/2 has been recognized as a model for MSCs, because of its multi-lineage differentiation potential. The purpose of this study was to explore whether C3H/10T1/2 cells have the potential to differentiate into insulin-producing cells (IPCs). Here, we investigated and compared the in vitro differentiation of rat MSCs and C3H10T1/2 cells into IPCs. After the cells underwent IPC differentiation, the expression of differentiation markers were detected by immunocytochemistry, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), quantitative real-time RT-PCR (qRT-PCR) and Western blotting. The insulin secretion was evaluated by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Furthermore, these differentiated cells were transplanted into streptozotocin-induced diabetic mice and their biological functions were tested in vivo. This study reports a 2-stage method to generate IPCs from C3H10T1/2 cells. Under specific induction conditions for 7-8days, C3H10T1/2 cells formed three-dimensional spheroid bodies (SBs) and secreted insulin, while generation of IPCs derived from rat MSCs required a long time (more than 2weeks). Furthermore, these IPCs derived from C3H10T1/2 cells were injected into diabetic mice and improves basal glucose, body weight and exhibited normal glucose tolerance test. The present study provided a simple and faithful in vitro model for further investigating the mechanism underlying IPC differentiation of MSCs and cell replacement therapy for diabetes.

PMID: 25724395
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان