خلاصه
بافت چربی و مغزاستخوان تامین کننده ی دو منبع مناسب از سلول های بنیادی مزانشیمی می باشند. هرچند مطالعات پیشین، شباهت نزدیک سلول های بنیادی مشتق از مغزاستخوان (BM-MSCها) و سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی (ADSCها) را تایید کرده اند، در مورد فنوتیپ مولکولی ADSCها شنااسس ناچیزی صورت گرفته است. در این مطالعه، ADSCهای موش از بافت چربی ناحیه ی ران موش هایی با سن 12 الی 14 هفته جداسازی شد. ADSCهای تازه جدا شده و نیز آن هایی که سه مرتبه پاساژ داده شده بودند به روش RT-PCR و جهت بررسی بیان ژن های OCT4، Sca-1، c-kit و CD34 مورد آنالیز قرار گرفتند. همچنین جهت بررسی حضور مارکرهای CD11b، CD45، CD31، CD29 و CD44، ADSCهای پاساژ خورده تحت آزمایش فلوسایتومتری قرار گرفتند. علاوه براین، تمایز ADSCها در شرایط in vitro به رده  سلول های قلبی، چربی و نورونی القا شد. ADSCهای تازه جداسازی شده، بیان ژن های OCT4، Sca-1، c-kit و CD34 را نشان دادند و کشت های دو روزه ی ADSCها با آنتی بادی منوکلونال ضد OCT-4 آمیزی شدند. پس از سه پاساژ، بیان OCT-4، c-kit و CD34 کاهش پیدا کرد، درحالیکه Sca-1 به طور قابل توجهی افزایش بیان نشان می داد. این سلول ها از نظر مارکرهای CD44 و CD29 مثبت و فاقد بیان CD45 و CD31 بودند. ADSCهایی با سه پاساژ به سلول های شبه نورون، کاردیومیست و آدیپوسیت تمایز یافتند که به ترتیب براساس رنگ آمیزی مثبت با آنتی بادی Sudan black، anti-cardiac troponin 1 و anti-map-2 شناسایی شدند. به عنوان نتیجه گیری، بافت چربی حاوی جمعیتی از سلول های بنیادی است که به نظر می رسد بتوانند به عنوان سلول های چندتوان مناسبی برای استفاده در روش های درمانی جایگزینی سلول در آینده به کار گرفته شوند.

Abstract

Bone marrow and adipose tissue have provided two suitable sources of mesenchymal stem cells. Although previous studies have confirmed close similarities between bone marrow-derived stem cells (BM-MSCs) and adipose tissue-derived stem cells (ADSCs), the molecular phenotype of ADSCs is still poorly identified. In the present study, mouse ADSCs were isolated from the inguinal fat pad of 12-14 weeks old mice. Freshly isolated and three passaged ADSCs were analyzed for the expression of OCT4, Sca-1, c-kit and CD34 by RT-PCR. Three passaged ADSCs were analyzed by flow cytometry for the presence of CD11b, CD45, CD31, CD29 and CD44. Moreover, cardiogenic, adipogenic and neurogenic differentiation of ADSCs were induced in vitro. Freshly isolated ADSCs showed the expression of OCT4, Sca-1, c-kit and CD34, and two days cultured ADSCs were positively immunostained with anti-OCT4 monoclonal antibody. After three passages, the expression of OCT4, c-kit and CD34 eliminated, while the expression of Sca-1 showed a striking enhancement. These cells were identified positive for CD29 and CD44 markers, and they showed the lack of CD45 and CD31 expression. Three passaged ADSCs were differentiated to adipocyte-, cardiomyocyte- and neuron-like cells that were identified based on the positive staining with Sudan black, anti-cardiac troponin I antibody and anti-map-2 antibody, respectively. In conclusion, adipose tissue contains a stem cell population that seems to be a good multipotential cell candidate for the future cell replacement therapy

Copyright 2010 Elsevier Ltd. All rights reserved

PMID : 20483444