تمایز سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق ازماتریکس بند ناف انسان به سلولهای شبه زایا
تاریخ انتشار: ﺳﻪشنبه 04 آذر 1393
| امتیاز:
سابقه و هدف:
سلولهای بنیادی مزانشیمی ((MSC سلول چندتوانی هستند که می توانند از منابع مختلف جمع آوری شوند. در شرایط خاص،MSC را می توان به سلول های ویژه بافت در شرایط آزمایشگاهی تمایز داد. سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف انسان (hUCMSCs) به راحتی قابل جمع آوری و در شرایط In vitro قابل کشت هستند. تولید سلولهای زایا از سلولهای بنیادی مزانشیمی یک عرصه بسیار جالب و امیدوار کننده در زمینه تولیدات دارویی است. در مطالعه حاضر، امکان تمایزمستقیم hUCMSCs به سلول های زایای شبه بدوی (PGC) در شرایط آزمایشگاهی در شرایط خاص انجام شد.
مواد و روشها:
سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف انسان کشت و در محیط DMEM حاوی 10٪ FBS تکثیر داده شد. سلول های کشت یافته برای توانایی تمایز به سلولهای چربی و استخوانی مورد مطالعه قرار گرفتند. علاوه براین، نشانگر مربوط به MSC ها توسط روش فلوسیتومتری بررسی شد. برای تمایز PGC، سلول های hUCMS در محیط تمایز حاوی پروتئین ریخت زای استخوانی 4 (BMP4) کشت داده شدند و سپس با رتینوئیک اسید (RA) دنبال شدند. از Real Time-PCR و تجزیه و تحلیل ایمونوسیتوشیمی برای بررسی بیان ژن و پروتئین های ویژه PGCاستفاده شد.
نتایج:
نتایج ما نشان داد که کشت hUCMSCs در حضور BMP4 و RA قادر به تمایز مستقیم به سلول های شبه PGC در شرایط آزمایشگاهی می باشند. نتایج Real Time-PCR و ایمونوسیتوشیمی نشان داد که سلول های تمایزیافته نشانگرهای ویژه PGC را پس از 14 روز کشت بیان کردند.
نتیجه گیری:
بر اساس این نتایج، نتیجه گرفته شد که hUCMSC ممکن است به عنوان یک منبع سلولی جایگزین امیدوار کننده در طب تولیدمثل در نظر گرفته شوند. مطالعات بیشتر از جمله مدل های آزمایشگاهی و همچنین حیوانی برای ارزیابی عملکرد PGCs تمایزیافته قبل از معرفی آنها برای کاربردهای بالینی مورد نیاز است.
Avicenna J Med Biotechnol. 2014 Oct;6(4):218-227.
Differentiation of Human Umbilical Cord Matrix-Derived Mesenchymal Stem Cells into Germ-Like Cells.
Latifpour M1, Shakiba Y2, Amidi F1, Mazaheri Z3, Sobhani A1.
Abstract
BACKGROUND:
Mesenchymal Stem Cells (MSCs) are multipotent cells that can be collected from different sources. Under specific conditions, MSCs can be differentiated to tissue specific cells in vitro. Human Umbilical Cord mesenchymal Stem Cells (hUCMSCs) can easily be harvested and cultured in in vitro conditions. Production of germ cells from mesenchymal stem cells is a very interesting and promising area in the field of reproductive medicine. In the present study, the possible trans-differentiation of hUCMSCs into Primordial like Germ Cell (PGC) was performed in vitro under specific condition.
METHODS:
Human umbilical cord mesenchymal stem cells were cultured and expanded in DMEM medium containing 10% FBS. The cultured cells were studied for differentiation ability to adipocytes and osteocytes. Furthermore, MSCs related markers were identified by flow cytometry method. For PGC differentiation, hUCMS cells were cultured in differentiation medium containing Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) and it was followed by retinoic acid (RA). Real time PCR and immunocytochemistry analysis were performed to evaluate the expression of PGC specific genes and proteins, respectively.
RESULTS:
Our results showed that hUCMSCs cultured in the presence of BMP4 and RA are able to transdifferentiate in to PGC like cells in vitro. Real time PCR and immunocytochemistry results showed that differentiated cells expressed PGC specific markers after 14 days of culture.
CONCLUSION:
Based on these results, it was concluded that hUCMSC may be considered as a promising alternative cell source in reproductive medicine. More studies including laboratory and also animal models are needed to evaluate the functionality of differentiated PGCs before introducing them to clinical applications.
PMID: 25414784