خلاصه:

در این مقاله، ما پروتکل­های تمایزی که مرحله­ی ابتدایی تکوین اعصاب در انسان را به منظور تولید پروژنیتورهای عصبی با بازدهی بالا تقلید می­کنند، شرح خواهیم  داد. در ابتدا هر دو نوع سلول hESCها و hiPSCها در شرایط  کشت بهینه شده بدون لایه­ی مغذی کشت داده شدند که این شرایط منجر به تشکیل کارای تجمعات سلولی خواهد شد. برای دستیابی اختصاصی به نورون­های اکتوردرمی، این تجمعات سلولی در یک محیط القای نورونی مشخص جهت تولید ساختارهای شبه خوشه­ی عصبی تمایز داده شدند. ساختارهای خوشه­ای به صورت کلنی­های کروی شناور توسعه پیدا کردند و می­توانستند تکثیر بیشتری یابند یا به انواع زیرگروه­های سلول­های عصبی تمایز پیدا کنند.    

Derivation, propagation, and characterization of neuroprogenitors from pluripotent stem cells (hESCs and hiPSCs).

Lie KH, Chung HC, Sidhu KS.

Abstract

The differentiation of human embryonic stem cells (hESCs) and human-induced pluripotent stem cells (hiPSCs) towards functional neurons particularly hold great potential for the cell-based replacement therapy in neurodegenerative diseases. Here, we describe a stepwise differentiation protocol that mimics the early stage of neural development in human to promote the generation of neuroprogenitors at a high yield. Both the hESCs and hiPSCs are initially cultured in an optimized feeder-free condition, which offer an efficient formation of aggregates. To specify the neuroectodermal specification, these aggregates are differentiated in a defined neural induction medium to develop into neural rosettes-like structures. The rosettes are expanded into free-floating sphere and can be further propagated or developed into variety of neuronal subtypes.