خلاصه:

آسیب سلول­های قرنیه انسان با مشکلات مربوط به دسترسی به سلول­های قرنیه جهت جایگزینی روبرو می­باشد. محدودیت منبع سلول­های قرنیه شناخته شده است. تلاش در جهت تولید سلول­های شبه اپی­تلیالی قرنیه از پیش­سازهای پوست انسان (hSKPها)، مورد هدف این مطالعه بوده است. ترکیب سه فاکتور رشد ضروری شامل فاکتور رشد اپی­درمی (EGF)، فاکتور رشد کراتینوسیتی (KGF) و فاکتور رشد هپاتوسیتی (HGF) به طور موفقیت آمیزی توانستند تمایز hSKPها به سلول­های قرنیه را القا کنند. سلول­های القا شده، مارکرهای سلول­های اپی­تلیالی قرنیه مانند کراتین 3 (K3) را که با آنتی بادی و وسترن بلات شناسایی شدند را بیان می­کنند. بیان ژن K3 در سلول­های hSKP القا شده با استفاده از تکنیک RT-PCR شناسایی شد. حضور این مارکرها در هر دو سطح ژن و پروتئین می­تواند منجر به این نتیجه­گیری شود که دگرتمایز مستقیم سلول­های hSKPها به سلول­های اپی­تلیالی قرنیه به طور موفقیت آمیزی تحت این پروتکل القای سلولی انجام گرفته است. یافته­ها نشان می­دهند که یک منبع در دسترسی از سلول­های بنیادی به آسانی از بافت پوست قابل حصول است. سلول­های اتولوگ حاصل از پوست انسان ممکن است در کاربردهای بالینی آینده برای درمان بیماری­های قرنیه قابل استفاده باشد.

In vitro transdifferentiation of corneal epithelial-like cells from human skin-derived precursor cells.

Source

Department of Pathology, Faculty of Medicine, Ramathibodi Hospital, Mahidol University, Bangkok 14140, Thailand.

Abstract

The damage of human corneal cells encounter with the problem of availability of corneal cells for replacement. Limitation of the source of corneal cells has been realized. An attempt of development of corneal epithelial-like cells from the human skin-derived precursor (hSKPs) has been made in this study. Combination of three essential growth factors: epidermal growth factor (EGF), keratinocyte growth factor (KGF) and hepatocyte growth factor (HGF) could demonstrate successfully induction of hSKPs to differentiation into corneal cells.The induced cells expressed the appearance of markers of corneal epithelial cells as shown by the presence of keratin 3 (K3) by antibody label and Western blot assay. The K3 gene expression of induced hSKPs cells as shown by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) technology was also demonstrated. The presence of these markers at both gene and protein levels could lead to our conclusion that the directional transdifferentiation of hSKPs cells into corneal epithelial cells was successfully done under this cell induction protocol. The finding shows a newly available stem cell source can be obtained from easily available skin. Cells from autologous human skin might be used for corneal disorder treatment in future clinical application