افزایش ویژگی های چسبندگی و تکثیری سلول های بنیادی پالپ دندان انسانی در داربست های PLGA از طریق میکروگرانش

تاریخ انتشار: ﺳﻪشنبه 19 اسفند 1393 | امتیاز: Article Rating

هدف:

از سیستم کشت سلولی چرخان برای مدل کردن میکروگرانش تحریک شده و بررسی اثرات آن روی تکثیر، چسبندگی، مهاجرت و سازماندهی اسکلت سلولی سلول های بنیادی پالپ دندان انسانی(hDPSCs) روی داربست های پلی لاکتیک کو اسید گلیکولیک(PLGA) استفاده شد.

روش:

سلول های بنیادی پالپ دندان انسانی جداسازی و شناسایی شده  که روی داربست های PLGA کشت داده شده به مدتت سه روز در معرض شرایط میکروگرانش تحریک شده(SMG) یا گرانش طبیعی(NG) قرار گرفتند. سنجش تکثیر سلولیMTT، سنجش های الحاقی BrdU، آنالیز فلوسایتومتری و وسترن بلات برای شناسایی توانایی تکثیری سلول های بنیادی پالپ دندان انسانی تحت شرایط میکروگرانش صورت گرفت. علاوه برآن، تشخیص ایمونوفلورسنس، مشاهدات SEM و مهاجرت سلولی و سنجش های چسبندگی برای مقایسه چسبندگی، مهاجرت و تغییرات اسکلت سلولی در سلول های بنیادی پالپ دندان انسانی تحت شرایط میکروگرانش انجام شد. برای بررسی بیشتر مکانیسم ها، آنالیزهای سنجش PCR برای چسبندگی و مسیرهای مرتبط با ماتریکس صورت گرفت. از Students t-test برای آنالیزهای آماری استفاده شد.

نتایج:

میکروگراشن اکثیر و چسبندگی را افزایش می دهد و مهاجرت را کاهش می دهد و در مقایسه با گروه گرانش طبیعی سازماندهی اسکلت سلولی در گروه میکروگرانش بهتر بود. آنالیزهای PCR بعد از تیمار  میکروگرانش نشان داد: ITGA6(اینتگرین آلفا6)، ITGAV( اینتگرین آلفا VITGB1( اینتگرین بتا1)، LAMB1(لامینین بتا1) و TNC(تناسینC) به طور معناداری تنظیم شده بودند(P0.05).

بحث:

میکروگرانش ممکن است رفتار سلول های بنیادی پالپ دندان انسانی رشد یافته روی داربست های PLGA را در روشی وابسته به اینتگرین ها تنظیم کند که ممکن است  در مهندسی بافت دندان با افزایش توانایی تکثیر و چسبندگی داربست مرتبط باشد.

Int Endod J. 2015 Feb 19. doi: 10.1111/iej.12441. [Epub ahead of print]

Increased proliferation and adhesion properties of human dental pulp stem cells in PLGA scaffolds via simulated microgravity.

He L1Pan SLi YZhang LZhang WYi HSong CNiu Y.

 

 

Abstract

AIM:

To explore the possibility of utilizing a rotary cell culture system (RCCS) to model simulated microgravity and investigate its effects on the proliferation, adhesion, migration and cytoskeletal organization of human dental pulp stem cells (hDPSCs) on Poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) scaffolds.

METHODOLOGY:

Isolated and identified hDPSCs grown on PLGA scaffolds were exposed to simulated microgravity (SMG) or normal gravity (NG) conditions for 3 days. MTT cell proliferation assays, BrdU incorporation assays, flow cytometry analysis and western blotting were implemented to identify the proliferation ability of hDPSCs under SMG conditions. Additionally, immunofluoresence detection, SEM observations and cell migration and adhesion assays were performed to compare adhesion, migration and cytoskeletal changes in hDPCSs subjected to SMG conditions. To further investigate the mechanisms, human pathway-focused matrix and adhesion PCR array analyses were performed. Student's t-test was used for statistical analyses.

RESULTS:

SMG promoted proliferation and adhesion, decreased migration and reorganized the cytoskeletal organization of hDPSCs compared with the NG group. PCR array analyses revealed that following SMG treatment, ITGA6 (Integrin alpha 6), ITGAV (Integrin alpha V), ITGB1 (Integrin beta 1), LAMB1 (Laminin beta 1) and TNC (Tenascin C) were significantly up-regulated (P<0.05).

CONCLUSIONS:

SMG may regulate the behavior of hDPSCs grown in PLGA scaffolds in an integrin-mediated manner, which may contribute totooth tissue engineering by increasing their expandability and scaffold adhesion. This article is protected by copyright. All rights reserved.

PMID: 25702704
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
Skip Navigation Links.
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان