بررسی مسیر درونی سازی میکروذرات به سلول های اندوتلیالی بند ناف انسان
تاریخ انتشار: جمعه 18 اردیبهشت 1394
| امتیاز:
هدف:
بررسی مکانیسم های زیر بنایی الحاق میکروذرات (MP) مشتق شده از سلول های بنیادی مزانشیمی (MSC) مغز استخوان انسان به سلول های اندوتلیال بند ناف انسان (HUVECs).
مواد و روشها:
میکروذرات از مایع رویی سلولهای بنیادی مزانشیمی که تحت شرایط هیپوکسی / حذف سرم قرار گرفته بودند جدا شدند. از میکروسکوپ الکترونی برای شناسایی میکروذرات استفاده شد. مشخصات مولکول های سطحی با روش فلوسیتومتری مبتنی بر بید مورد بررسی قرار گرفت. سطح بیان گیرنده فسفاتیدیل سرین (PSR) توسط سیتوشیمی ایمونوفلورسانس شناسایی شد. میکروذرات با سلول های اندوتلیال بند ناف در حضور و عدم حضور آنتی بادی گیرنده فسفاتیدیل سرین هم کشتی داده شدند و میزان ورود میکروذرات با استفاده از میکروسکوپ اسکن لیزری مشاهده شد.
نتایج:
میکروذرات به دست آمده از سلول های بنیادی مزانشیمی بیان بالایی از فسفاتیدیل سرین داشتند، در حالی که گیرنده فسفاتیدیل سرین در سطح HUVECs بیان شدند. نتیجه تصاویر کانفوکال نشان داد که میکروذرات به سرعت می توانند توسط سلول های اندوتلیال جذب شوند و به طور عمده در سیتوپلاسم اطراف هسته توزیع می شوند. میزان ورود میکروذرات به طور قابل توجهی پس از مهار ویژه گیرنده های فسفاتیدیل سرین کاهش می یابد.
نتیجه گیری:
واکنش بین فسفاتیدیل سرین در میکروذرات و گیرنده فسفاتیدیل سرین در سلول های اندوتلیال بند ناف انسان نقش مهمی در ورود میکروذرات سلول های بنیادی مزانشیمی ایفا می کند.
Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2015 Apr;23(2):495-9. doi: 10.7534/j.issn.1009-2137.2015.02.039.
[Investigation on the internalization pathway of microparticles into human umbilical cord endothelial cells].
[Article in Chinese]
Wei XJ1, Zhang HC2, Shen ZZ3, Wang F4, Wang Y4, Guo ZK4, Liu CZ5,6.
Abstract
OBJECTIVE:
To investigate the mechanisms underlying the incorporation of microparticles(MP) derived from human bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) into human umbilical cord endothelial cells (HUVECs).
METHODS:
MPs were isolated from the supernatants of MSCs which had exposed to a hypoxia/serum-deprivation condition. Electron microscope was used to identify the MPs. The surface molecule profile was evaluated with the bead-based flow cytometry technique. The expression level of the phosphatidylserine receptor (PSR) was detected by immunofluorescence cytochemistry. MPs were co-cultured with HUVECs in the presence or absence PSR-antibody, and the internalization of MPs was observed with laser scanning microscopy.
RESULTS:
The MPs derived from MSCs expressed highly PS, while PSR expressed on the surface of HUVECs. The confocal result revealed that MPs could quickly be uptaken by the endothelial cells, and mainly distributed in the cytoplasm surrounding of the nuclei. The internalization of MPs reduced significantly after PSR specific blockage.
CONCLUSION:
The reaction between PS on the MP and the PSR of HUVECs plays an important role in the internalization of MSC-MPs.
PMID: 25948212