miR-17 باعث گسترش و چسبندگی سلول های CD34+ خون بندناف انسانی در شرایط آزمایشگاهی می شود

تاریخ انتشار: پنجشنبه 19 شهریور 1394 | امتیاز: Article Rating

مقدمه: به تازگی متوجه شده ایم که miR-17 در کنترل خارجی سلول و عملکرد سلول CD34+ خون بندناف (CB) ضروری است. در اینجا، نشان دادیم که  سطح مطلوبی از miR-17 نیز در کنترل داخلی سلول های پیش ساز خونساز CD34+ خون بندناف حیاتی می باشد.

روش ها: مدل های بیان بیش از حد miR-17 و Knockdown با استفاده از سلول های اولیه CD34+ خون بندناف ترنسفکت شده توسط وکتورهای پیشنهاد شده ایجاد شدند. آزمایشات کشت طولانی مدت، تشکیل کلنی، چسبندگی و مهاجرت ترانس مناسب جهت بررسی عملکرد miR-17 بر روی سلول های CD34+ خون بندناف در شرایط آزمایشگاهی انجام گردید. موش NOD prkdc(scid) IL2rg(null) در سنجش تکثیر سلولی SCID جهت بررسی عملکرد 17 بر روی سلول های CD34+ خون بندناف در شرایط آزمایشگاهی استفاده شد. برای مقایسه آماری از آزمون t-test Student’s دو طرفه استفاده شد.

نتایج: ارزیابی های آزمایشگاهی نشان داد که بیان نابجای miR-17 باعث گسترش طولانی مدت، به خصوص در تشکیل کلنی سلول های CD34+ و سلول های CD34+ CD38- خون بندناف می شود. در مقابل، کاهش تنظیمی miR-17 از بیان سلول های CD34+ خون بندناف جلوگیری می کند. با این حال، بیان بیش از حد miR-17 در داخل بدن قدرت بازسازی خونسازی سلول های CD34+ خون بندناف را در مقایسه با سلول های کنترل می کاهد. افزایش بیان مولکول های اصلی چسبندگی در سلول های CD34+ خون بندناف با بیان بیش از حد miR-17 پیشنهاد می کند که چسبندگی بین سلول های CD34+ خون بندناف با بیان بیش از حد miR-17 و نیچ آنها در داخل بدن به طور غیرطبیعی تنظیم می شود، که ممکن است بیشتر منجر به کاهش ظرفیت بازسازی خونسازی سلول های 17/OE در موش پیوند شده شود.

نتیجه گیری: نتیجه می گیریم که بیان مناسب miR-17، حداقل در بخشی، برای تعامل نیج با سلول بنیادی خونساز طبیعی و برای تنظیم خونسازی بالغین ضروری است.

Stem Cell Res Ther. 2015 Sep 7;6(1):168. doi: 10.1186/s13287-015-0159-1.

miR-17 promotes expansion and adhesion of human cord blood CD34(+) cells in vitro.

Abstract

INTRODUCTION:

We have recently found that miR-17 is necessary in the cell-extrinsic control of cord blood (CB) CD34(+) cell function. Here, we demonstrated that the proper level of miR-17 is also necessary in the cell-intrinsic control of the hematopoietic properties of CB CD34(+) cells.

METHODS:

The miR-17 overexpression and knockdown models were created using primary CB CD34(+) cells transfected by the indicated vectors. Long-term culture, colony forming, adhesion and trans-well migration assays were carried out to investigate the function of miR-17 on CB CD34(+) cells in vitro. NOD prkdc (scid) Il2rg (null) mice were used in a SCID repopulating cell assay to investigate the function of miR-17 on CB CD34(+) cells in vivo. A two-tailed Student's t-test was used for statistical comparisons.

RESULTS:

In vitro assays revealed that ectopic expression of miR-17 promoted long-term expansion, especially in the colony-forming of CB CD34(+) cells and CD34(+)CD38(-) cells. Conversely, downregulation of miR-17 inhibited the expansion of CB CD34(+) cells. However, the overexpression of miR-17 in vivo reduced the hematopoietic reconstitution potential of CB CD34(+) cells compared to that of control cells. The increased expression of major adhesion molecules in miR-17 overexpressed CB CD34(+) cells suggests that the adhesion between miR-17 overexpressed CB CD34(+) cells and their niche in vivo is regulated abnormally, which may further lead to the reduced hematopoietic reconstitution capability of 17/OE cells in engrafted mice.

CONCLUSION:

We conclude that the proper expression of miR-17 is required, at least partly, for normal hematopoietic stem cell-niche interaction and for the regulation of adult hematopoiesis.

PMID: 26345634
فایل های پیوستی
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
Skip Navigation Links.
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان