چکیده:

جدا از کبد، شناسایی اندام­ها و یا اجزای سلولی که به طور قابل توجهی در تولید فاکتور هشت انسانی (FVIII) مشارکت دارند، مشکل بوده است. بنابراین، تنها سلول های اندوتلیالی مشخص شده اند که یک منبع خارج کبدی برای تولید FVIII می باشند و این امر می تواند توضیحی برای حضور متنوع mRNAی FVIII در بدن و مشاهده افزایش سطح FVIII در طول نارسایی کبد محسوب شود. در اینجا، ما بررسی کردیم که آیا سلول های بنیادی مزانشیمی (MSC) انسان که در اندام های مختلف حضور دارند، می توانند در تولید FVIII نیز مشارکت داشته باشند. همانطور که به روش RT-PCR تعیین شد، MSC جدا شده از ریه، کبد، مغز و مغز استخوان mRNAی FVIII را بیان می کردند. با استفاده از آنتی بادی اختصاصی برای FVIII، میکروسکوپ هم کانون و سلول های اندوتلیالی مشتق از بند ناف (HUVEC) به عنوان کنترل منفی، ما نشان دادیم که در MSC پروتئین FVIII به صورت گرانول ذخیره نمی شود بلکه در ناحیه مجاور هسته مستقر می گردد. علاوه براین، FVIII کارآمد در مایع رویی MSC و عصاره سلولی به روش aPTT و رنگ سنجی شناسایی شد. این نتایج نشان می دهند که MSC می تواند در سطح پایینی در تولید FVIII کارآمد مشارکت داشته باشند و درک فیزیولوژی تولید و ترشح FVIII  را ارتقا بخشند.

Mesenchymal stem cells contribute to endogenous FVIIIc production.

Source

Department of Animal Biotechnology, University of Nevada, Reno, NV USA.

Abstract

Besides the liver, it has been difficult to identify which organ(s) and/or cellular component(s) contribute significantly to the production of human FVIII:c (FVIII). Thus far, only endothelial cells have been shown to constitute a robust extrahepatic source of FVIII, possibly explaining both the diverse presence of FVIII mRNA in the body, and the observed increase in FVIII levels during liver failure. Here, we investigate whether human mesenchymal stem cells (MSC), ubiquitously present in different organs, could also contribute to FVIII production. MSC isolated from human lung, liver, brain, and bone marrow expressed FVIII message as determined by quantitative-RT-PCR. Using an antibody specific for FVIII, confocal microscopy, and umbilical cord-derived endothelial cells (HUVEC) as a negative control, we demonstrated that, in MSC, FVIII protein was not stored in granules; rather, it localized to the perinuclear region. Furthermore, functional FVIII was detected in MSC supernatants and cell lysates by aPTT and chromogenic assays. These results demonstrate that MSC can contribute at low levels to the functional FVIII pool, and advance the understanding of the physiology of FVIII production and secretion. J. Cell. Physiol