اثرات سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان روی مشخصه های زیستی مهاجرت و خانه گزینی در سلول های میلومای مولتیپل
تاریخ انتشار: چهارشنبه 22 اردیبهشت 1395
| امتیاز:
هدف:
برای ایجاد سیستم هم کشتی برای سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان(BMMSC) و سلول های مولتیپل میلوما(MM)، و برای بررسی اثرات هم کشتی سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان روی مهاجرت و خانه گزینی سلول های میلومای مولتیپل.
روش ها:
سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان از موش تراریخته با استخوان جنینی پروتئین سبز فلورسنس(GFP) بوسیله غربالگری چسبنده کشت داده شدند. یک سیستم هم کشتی از سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان و سلول های XG-7 رده سلولی مولتیپل میلوما ساخته شد، تکثیر و آپوپتوز سلول ها به ترتیب بوسیله تریپان بلو و انکسین V و پروپودیم یدید(PI) سنجیده شد. رنگ آمیزی MDC برای تشخیص اتوفاژی به کار برده شد. جهت حرکت پراکنش مولکولی در سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان و سلول های XG-7 نشان دار شده با PE-CD138 در فرایند هم کشتی به طور دینامیک و با استفاده از میکروسکوپ کانفوکال مشاهده شد.
نتایج:
بعد از هم کشتی سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان GFP شده، مقاوت سلول های XG-7 به آپوپتوز و اتوفاژی تقویت شد و به طور همزمان تکثیر آن ها افزایش یافت. نرخ آپوپتوز سلول های XG-7 که به طور مستقیم و غیر مستقیم با سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان هم کشت شده بودند به ترتیب(6.23±0.12) و (6.97±0.03) درصد بوده است که نسبت به سلول های XG-7 به تنهایی کشت شده(17.90±1.46) درصد پایین تر بود. در این جا سطح کمی از اتوفاژی در سلول های XG-7 هم کشت شده با سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان وجود داشت. سلول های XG-7 بسیار قطبی شده بودند و زیر میکروسکوپ کانفوکال حاوی دومین های غشایی خاص با اجزای پروتئینی و چربی خاص در تماس سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان بودند. بعد از تیمار متیل بتا سیکلودکسترین، مولکول ها به طور طبیعی در دومین های خاصی غنی شدند.
بحث:
سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان می تواند سلول های XG-7 را از آپوپتوز و اتوفاژی محافظت کند و به طور واضح تکثیر سلول های XG-7 را افزایش دهند و می تواند مهاجرت و خانه گزینی سلول های مولتیپل میلوما را تحت تاثیر قرار دهد.
Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2016 Apr;24(2):469-73. doi: 10.7534/j.issn.1009-2137.2016.02.030.
[Effects of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells on the Biological Characteristics of Migrating and Homing in Multiple Myeloma Cells].
[Article in Chinese]
Zhang YL1, Fu JX2, Zhang H2, Zhu HL1, Ouyang GF3.
Abstract
OBJECTIVE:
To construct a co-culture system for bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) and multiple myeloma (MM) cells, and to investigate the effects of co-cultured BMMSC on the migrating and homing of multiple myeloma cells.
METHODS:
The BMMSC from the transgenic mice with green fluorescent protein (GFP) fetal bone were cultured by adherent screening. A co-culture system of BMMSC and MM cell line XG-7 cells was constracted, the proliferation and apoptosis of cells were determined by trypan blue exclusion and Annexin V/PI, respectively, MDC staining was employed to detect the autophagy. The moving direction distribution of molecule in BMMSC and XG-7 cells labeled with PE-CD138 in co-culture process were observed dinamically by confocal microscopy.
RESULTS:
After co-culture with GFP-BMMSC, the resistance of XG-7 cells to apoptosis and autophagy were enhanced; at the same time, their proliferation increased. Apoptosis rates of XG-7 cells directly and indirectly co-cultured with BMMSC were (6.23 ± 0.12)% and (6.97 ± 0.03)% respectively, which were lower than that of XG-7 cells cultured alone (17.90 ± 1.46)% (P < 0. 01). There was low level of autophagy in XG-7 cells co-cultured with BMMSC. XG-7 cells are highly polarized and contained a specialized membrane domain with specific protein and lipid components to contact with BMMSC under confocal microscope. After methyl-β-cyclodextrin treatment, the molecules were normally enriched in the specialized domain.
CONCLUSION:
BMMSC can protect XG-7 cells from apoptosis and autophagy, and obviously promote the proliferation of XG-7 cells, and can influence the migrating and homing of multiple myeloma cells.
PMID: 27151012