تمایز آزمایشگاهی سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از ژله وارتون به سلول های مویی شنوایی و نورون ها
تاریخ انتشار: ﺳﻪشنبه 15 تیر 1395
| امتیاز:
هدف:
ما برای القای سلول های بنیادی مزانشیمی(MSCs) مشتق از ژله وارتون(WJ) برای تمایز به سلول های پیش ساز عصبی، نورون ها و سلول های مویی شنوایی تلاش کردیم.
مواد و روش ها:
سلول های بنیادی مزانشیمی از ژله وارتون بند ناف انسانی جداسازی شد و در محیط حاوی فاکتور رشد اپی درمی و فاکتور رشد فیبروبلاستی بازی کشت داده شد. تمایز به سلول های مویی و نورون ها با استفاده از محیط نوروبازال حاوی فاکتور نوروتروفیک مشتق از سلول های گلیالی، فاکتور نوروتروفیک مشتق از مغز و فاکتور نوروتروفیک 3 القا شد. روش های FACS، ایمونوسیتوشیمی و RT-PCR برای تشخیص سلول های مویی شنوایی تمایز یافته و نورون ها انجام گرفت.
نتایج:
سلول های بنیادی مزانشیمی جداسازی شده از ژله وارتون با استفاده از FACS اثبات شدند. ایمونوسیتوشیمی دوگانه بیان مارکرهای سلول های مویی میوزین VIIA و TRPA1 و مارکر عملکردی پروتئین2 متصل شونده به C-terminal را اثبات کرد. تمایز به نورون ها با استفاده از مارکرهای نوروفیلامنت و توبولین بتا3 نشان داده شد. بیان ژن های مارکرهای خاص رده عصبی مرحله تمایز عصبی را اثبات کرد.
بحث:
سلول های بنیادی مزانشیمی از ژله وارتون انسانی می تواند با موفقیت برای تمایز به سلول های مویی و نورون ها القا شود.
J Int Adv Otol. 2016 Apr;12(1):37-42. doi: 10.5152/iao.2016.1190.
In Vitro Differentiation of Human Wharton's Jelly-Derived Mesenchymal Stem Cells into Auditory Hair Cells and Neurons.
Kil K1, Choi MY, Park KH.
Abstract
OBJECTIVE:
We attempted to induce mesenchymal stem cells (MSCs) from human Wharton's jelly (WJ) to differentiate into neuronal progenitor cells, neurons, and auditory hair cells.
MATERIALS AND METHODS:
MSCs were isolated from WJ from human umbilical cords and cultured in medium containing epidermal growth factor and basic fibroblast growth factor. Differentiation into hair cells and neurons was induced using a neurobasal medium containing glial cell-derived neurotrophic factor, brain-derived neurotrophic factor, and neurotrophic factor 3. Fluorescence-activated cell sorting (FACS), immunocytochemistry, and reverse transcription polymerase chain reaction were performed to characterize the differentiated auditory hair cells and neurons.
RESULTS:
MSCs isolated from human WJ were confirmed by FACS. Double immunocytochemistry confirmed the expression of the hair cell markers myosin VIIA and TRPA1 and the functional marker C-terminal binding protein 2. Differentiation into neurons was revealed using neurofilament and βIII-tubulin markers. Gene expression of neuronal lineage-specific markers confirmed the neuronal differentiation state.
CONCLUSION:
MSCs from human WJ can be successfully induced to differentiate into auditory hair cells and neurons in vitro.
PMID: 27340981