فرآوری خون بند ناف با استفاده از یک سیستم فیلتراسیون جدید
تاریخ انتشار: جمعه 22 مرداد 1395
| امتیاز:
اهداف:
سهولت فرآوری خون بند ناف بوسیله به دلیل نیاز به تکنیک های سانتریفیوژی الکتریکی که اغلب تنها محصول سلولی نهایی اندکی تولید می کنند، محدود شده است. در این جا، ما طراحی و شناسایی یک سیستم فیلتری جدید کمک کننده به فرآوری خون بند ناف با استفاده از جریان گرانش ملایم را توصیف کردیم.
مواد و روش ها:
خون بند ناف با یک سیستم فیلتری جدید(CellEffic خون بند ناف، شامل یک ساخت غیر بافته شده) و بدون استفاده از سانتریفوژ فرآوری شد. سلول ها بوسیله فلاش کردن فیلتر با HES یا محلول سالین فیزیولوژیک(سالین) فیلتر شد. تعداد سلول های افتراقی و آنالیز زیستایی در ترکیب با FACS(سلول های هسته دار کل، سلول های تک هسته ای، سلول های CD45+CD34+، سلول های پیش ساز خون ساز) ارزیابی کلونی زایی برای آنالیز خون بند ناف قبل و بعد از فرآوری و بعد از فریز/ذوب کردن به کار برده شد.
نتایج:
فرآوری با استفاده از فیلتر جدید با کیفیت بالایی سلول های قرمز خونی را کاهش داده و به خوبی سلول های هسته دار کل، سلول های تک هسته ای، سلول های CD45+CD34+، سلول های پیش ساز خون ساز و واحدهای تشکیل دهنده کلونی(CFU) ریکاوری کرد. فیلتر با استفاده از HES یا سالین به خوبی و به میزان یکسانی انجام شد. جریان گرانشی پایین حرکت سلولی ملایمی را ارائه کرد و اجزای سلول های بنیادی را به خوبی حقظ کرد. نتیجه واحدهای تشکیل دهنده کلونی بعد از ذوب به طور ویژه ای حفظ شد و نشانگر مهمی برای ذخیره سازی خون بند ناف بود.
بحث:
محدودیت های جغرافیایی پیوند خون بند ناف و ذخیره سازی نیازمند یک راه حل غیر الکتریکی، غیر سانتریفوژی است. این فیلتر جدید CellEffic خون بند ناف، فرایند فرآوری سلولی ملایمی را با حفظ اجزای سلول های بنیادی/پیش ساز مورد نیاز برای درمان های خونی و طب بازساختی نشان داد.
Cell Prolif. 2015 Dec;48(6):671-81. doi: 10.1111/cpr.12217. Epub 2015 Oct 12.
Cord blood processing by a novel filtration system.
Sato N1, Fricke C2, McGuckin C3, Forraz N3, Degoul O3, Atzeni G3, Sakurai H2.
Abstract
OBJECTIVES:
Availability of cord blood (CB) processing has been limited by the need for electrically aided centrifugal techniques, which often produce only low final cell product yield. Here, we describe development and characterization of a novel filter device aimed at allowing CB processing, using gentle gravity-led flow.
MATERIALS AND METHODS:
CB was processed with a novel filter device (CellEffic CB, consisting of non-woven fabric), without any centrifugation. Cells were harvested by flushing the filter with either HES or physiological saline solution (SALINE). Differential cell counts and viability analysis, combined with Fluorescence-Activated Cell Sorting (FACS) (total nucleated cells [TNC], mononuclear cells [MNC], CD45+ CD34+ cells, hematopoietic precursor cells [HPCs]) and clonogenic assay, were employed for analysis of CB pre- and post-processing, and after freeze/thawing.
RESULTS:
Processing using the novel filter yielded high quality RBC depletion while maintaining good recovery of TNC, MNC, CD34+, HPCs and colony forming unit (CFU) output. The filter performed equally well using HES or SALINE. Gravity-led flow provided gentle cell movement and protection of the stem cell compartment. Post-thaw CFU output was maintained particularly, an important indicator for CB banking.
CONCLUSIONS:
Geographical limitations of CB transplantation and banking have required a non-electrical, non-centrifugal solution. This novel filter CellEffic CB device revealed rapid yet gentle cell processing while maintaining the stem/progenitor cell compartment required for both haematological and regenerative medicine therapies.
PMID: 26456086