اثر فعال کننده گیرنده NFκBو لیگاند RANK روی تمایز آزمایشگاهی سلول های بنیادی خون ساز CD133+ خون بند ناف به استئوکلاست ها
تاریخ انتشار: پنجشنبه 25 شهریور 1395
| امتیاز:
هدف:
به نظر می رسد که فعال کننده گیرنده لیگاند NFκB یا RANKL یک فاکتور فعال کننده استئوکلاستی باشد که نقش مهمی را در بیماری زایی مولتیپل میلوما بازی می کند. برخی مطالعات نشان داده اند که رده سلولی میلومایی U-266 و سلول های میلومایی اولیه RANK و RANKL را بیان کرده اند. گزارش شده است که بیان مارکرهای میلوئیدی و منوسیتوئیدی بوسیله هم کشتی سلول های میلومایی با سلول های بنیادی خون ساز(HSCs) افزایش یافته است. هم چنین این مطالعه تلاش کرد مکانیسم مولکولی RANK و RANKL روی قابلیت تمایزی سلول های بنیادی خون ساز خون بند ناف انسانی به استئوکلاست ها و هم چنین بیان گیرنده کلسی تونین(CTR) روی سطح سلول های بنیادی خون ساز خون بند ناف را نشان دهد.
مواد و روش ها:
در این مطالعه آزمایشگاهی، سلول های بنیادی خون ساز CD133+ از خون بند ناف جداسازی شدند و در حضور فاکتور تحریک کننده کلونی ماکروفاژی(M-CSF) و RANKL کشت شدند. تمایز استئوکلاستی با استفاده از رنگ آمیزی اسید فسفاتاز مقاوم به تترات(TRAP)، رنگ آمیزی گیمسا و سنجش ایمنوفنوتیپینگ و RT-PCR برای ژن های خاص مشخص شد.
نتایج:
سلول های بنیادی خون ساز قبل و بعد از تمایز به استئوکلاست ها RANKرا بیان کردند. در مقایسه با گروه کنترل، نتایج فلوسایتومتری افزایش بیان RANKL بعد از تمایز را نشان داد. بیان CTRmRNA نشان داد واکنش TRAP در برخی از سلول های تمایز یافته مثبت از جمله سلول های استئوکلاستی مثبت بوده است.
بحث:
حضور RANKL و M-CSF در مغز استخوان می تواند تمایز سلول های بنیادی خون ساز به استئوکلاست را القا کند.
Cell J. 2016 Fall;18(3):322-31. Epub 2016 Aug 24.
Effect of The Receptor Activator of Nuclear Factor кB and RANK Ligand on In Vitro Differentiation of Cord Blood CD133(+) Hematopoietic Stem Cells to Osteoclasts.
Kalantari N1, Abroun S1, Soleimani M1, Kaviani S1, Azad M2, Eskandari F1, Habibi H1.
Abstract
OBJECTIVE:
Receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANKL) appears to be an osteoclast-activating factor, bearing an important role in the pathogenesis of multiple myeloma. Some studies demonstrated that U-266 myeloma cell line and primary myeloma cells expressed RANK and RANKL. It had been reported that the expression of myeloid and monocytoid markers was increased by co-culturing myeloma cells with hematopoietic stem cells (HSCs). This study also attempted to show the molecular mechanism of RANK and RANKL on differentiation capability of human cord blood HSC to osteoclast, as well as expression of calcitonin receptor (CTR) on cord blood HSC surface.
MATERIALS AND METHODS:
In this experimental study, CD133(+) hematopoietic stem cells were isolated from umbilical cord blood and cultured in the presence of macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) and RANKL. Osteoclast differentiation was characterized by using tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining, giemsa staining, immunophenotyping, and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) assay for specific genes.
RESULTS:
Hematopoietic stem cells expressed RANK before and after differentiation into osteoclast. Compared to control group, flow cytometric results showed an increased expression of RANK after differentiation. Expression of CTR mRNA showed TRAP reaction was positive in some differentiated cells, including osteoclast cells.
CONCLUSION:
Presence of RANKL and M-CSF in bone marrow could induce HSCs differentiation into osteoclast.
PMID: 27602313