پیوند صفحات سلولی شبه غضروفی بدون داربست مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان برای ترمیم غضروف: یک مطالعه پیش درمانگاهی

تاریخ انتشار: پنجشنبه 15 مهر 1395 | امتیاز: Article Rating

هدف:

هدف این مطالعه تعیین شرایط کشتی که صفحات سلولی شبه غضروفی بدون داربست مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان با دوامی را ایجاد می کند و هم چنین ارزیابی اثرات آن ها بعد از پیوند به نقص های درون غضروفی درون رت های nude بود.

طراحی:

(آزمایش1) سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسانی از سه فرد مذکر جداسازی شد  و ظرفیت تکثیری و غضروف زایی آن ها در پاساژ یک ارزیابی شد و سلول ها نیز در سه شرایط کشت مختلف تکثیر شدند:(1) سروم جنین گاوی یا FBS 5 درصد(2) FBS ده درصد (3) FBS‌پنج درصد به همراه FGF2. سلول ها استخراج شده و کشت رسوبی غضروف زا ایجاد شد. نرخ تکثیر سلولی، نسبت گلیکوز آمینوگلیکان/DNA، و شدت رنگ آمیزی سافرانین-O شرایط کشت سلولی 3 در مقایسه با شرایط یک و دو بیشتر بود.(آزمایش2) سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسانی تکثیر شده و سه بار تحت شرایط کشت سوم پاساژ داده شدند و صفحات سلولی در محیط غضروف زا با یا بدون FBS ساخته شدند. صفحات سلولی ساخته شده با FBS اندازه و لبه های پهن شان را حفظ کردند.(آزمایش 3) صفحات سلولی به نقص های استخوانی غضروفی در رت های nude پیوند شدند و آنالیز بافتی در هفته های 2، 4 و 12 بعد از جراحی صورت گرفت.

نتایج:

ترمیم استخوانی غضروفی بعد از پیوند صفخات در مقایسه با گروه کنترل بهتر بود و به طور معناداری نمره Wakitani را بهبود بخشید. رنگ آمیزی ایمنی با آمنی ویمنتین خاص انسان نشان داد که سلول های پیوند شده در هفته 12 کمتر شده و ناپدید شدند.

بحث:

این نتایج نشان می دهد که کشت با FGF-2 ممکن است به تولید سریع شمار کافی از سلول ها برای تولید صفحات سلولی شبه غضروفی بدون داربست با ثبات و قابل اعتماد که در بازسازی نقایص استخوانی غضروفی مشارکت می کنند، کمک می کند.

 

Cartilage. 2016 Oct;7(4):361-72. doi: 10.1177/1947603515627342. Epub 2016 Feb 9.

Transplantation of Scaffold-Free Cartilage-Like Cell-Sheets Made from Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells for Cartilage Repair: A Preclinical Study.

Itokazu M1, Wakitani S2, Mera H3, Tamamura Y4, Sato Y5, Takagi M5, Nakamura H6.

Abstract

OBJECTIVE:

The object of this study was to determine culture conditions that create stable scaffold-free cartilage-like cell-sheets from human bone marrow-derived mesenchymal stem cells (hBMSCs) and to assess their effects after transplantation into osteochondral defects in nude rats.

DESIGN:

(Experiment 1) The hBMSCs were harvested from 3 males, the proliferative and chondrogenic capacities were assessed at passage 1, and the cells were expanded in 3 different culture conditions: (1) 5% fetal bovine serum (FBS), (2) 10% FBS, and (3) 5% FBS with fibroblast growth factor 2 (FGF-2). The cells were harvested and made chondrogenic pellet culture. The cell proliferation rate, glycosaminoglycan/DNA ratio, and safranin-O staining intensity of pellets cultured condition 3 were higher than those of conditions 1 and 2. (Experiment 2) The hBMSCs were expanded and passaged 3 times under culture condition 3, and fabricate the cell-sheets in chondrogenic medium either with or without FBS. The cell-sheets fabricated with FBS maintained their size with flat edges. (Experiment 3) The cell-sheets were transplanted into osteochondral defects in nude rats. Histological analysis was performed at 2, 4, and 12 weeks after surgery.

RESULTS:

The osteochondral repair was better after sheet transplantation than in the control group and significantly improved Wakitani score. Immunostaining with human-specific vimentin antibody showed that the transplanted cells became fewer and disappeared at 12 weeks.

CONCLUSIONS:

These results indicate that culture with FGF-2 may help to quickly generate sufficient numbers of cells to create stable and reliable scaffold-free cartilage-like cell-sheets, which contribute to the regeneration of osteochondral defects.

PMID: 27688844
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
Skip Navigation Links.
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان