گزارشات نشان داده اند که توان استخوان سازی سلول های بنیادی مزانشیمی (MSCs) حاصل از خون بند ناف (UCB) بر روی بسترهای متخلخل پلی لاکتید-کو-گلیکولید (PLGA) بسته به ترکیبات پلیمر (80:20، 75:25 و 70:30 درصد از PLA:PGA) به طرق متفاوتی منجر به تمایز سلول ها به سلول های استخوان ساز می گردد. در کنار ترکیبات پلیمر، ماتریکس کریستالی NaCl فیوز شده پیش از اضافه کردن حلال، فرآیند ایجاد منافذ و اتصالات بین آنها را در بسترهای سه بعدی بهبود می بخشد. مطالعات FTIR و XRD بسترهای PLGA نیز این اتصالات بین منافذ، توزیع یکنواخت فازها و تشکیل کریستال در بسترها را تایید کردند. در سه ترکیب بستر، نمونه B (75:25) بیشترین تخلخل با قابلیت مناسبی از جذب آب را نشان داد. اثر ترکیبات پلیمر و تخلخل بر تکثیر سلول ها به روش MTT بررسی شد که مشخص شد نمونه B به دلیل ساختار داخلیش، تاثیر بهتری بر تکثیر سلول ها داراست. برای تایید بیشتر نتایج بالا با استفاده از RT-PCR، بیان ژن های Col-I و ALP مورد مطالعه قرار گرفت. مطالعات ایمونوفلورسنت نیز نشاندهنده سازمان یابی رشته های اکتین خارج سلولی بر روی بسترهایی بود که اتصال و تکثیر سلول ها بر روی آنها با افزایش محتوی یک پلیمر هیدروفیلی به نام PGA بیشتر می شد.

Study on Osteoblast like Behavior of Umbilical Cord Blood Cells on Various Combinations of PLGA Scaffolds Prepared by Salt Fusion.

Mekala NK, Baadhe RR, Parcha SR.

Source

Dept of Biotechnology National Institute of Technology, Warangal 506004, India. mekalanaveenkumar@gmail.com.

Abstract

The osteogenic potential of mesenchymal stem cells (MSCs) from umbilical cord blood (UCB) on porous poly lactide-co-glycolide (PLGA) scaffolds have been reported to differentially support osteogenic differentiation based on polymer composition (80:20, 75:25 and 70:30 percent of PLA: PGA, respectively). Along with polymer composition; fused NaCl crystal matrix prior to solvent casting improves the porosity and pore interconnectivity in 3D scaffolds, which has significant impact on cell proliferation. FTIR and XRD studies of PLGA scaffolds also verified the intermolecular interactions, phase distribution and crystallinity in scaffolds. Among three scaffold combinations, sample B (75:25) has showed maximum porosity with optimum water uptake/retention abilities. Impact of polymer composition and porosity on cell proliferation was investigated through MTT assay, where sample B was observed to be supporting better cell proliferation, due to its internal structure. The above results were further confirmed by ALP and Col-I gene expression studies using RT-PCR. Immunofluorescent studies also revealed the extracellular filamentous actin organization over the scaffolds, where cell adhesion and proliferation was found to be higher with increase in PGA content, which is a hydrophilic polymer.