اثرات سیستم های کشت مختلف روی توانایی تمایز خون سازی سلول هایiPS
تاریخ انتشار: جمعه 10 دی 1395
| امتیاز:
هدف:
بررسی اثرات آزمایشگاه سیستم های کشت مختلف روی توان تمایز خون سازی سلول های بنیادی پرتوان القایی(iPS)
روش ها:
دو سیستم کشت شامل E8 و mTESR(محیط کشت بدون فیدر)، و محیط کشت کلاسیک ES برای کشت سلول های iPS انتخاب شدند. سلول های iPSکشت شده در سیستم های کشت مذکور با سلول های OP9(سلول های استرومایی مغز استخوان موشی) در آزمایشگاه هم کشت شدند تا تمایز به سلول های بنیادی/پیش ساز خون ساز را القا کنند. فلوسایتومتری و qRT-PCR برای تشخیص بیان مارکرهای خاص سلول های خون ساز و اثرات سیستم های کشت مختلف روی تمایز iPSها در آزمایشگاه استفاده شد.
نتایج:
سلول های iPSکشت شده در سه محیط کشت شده می توانند به سلول های بنیادی خون ساز تمایز یابند. کارایی تمایز خون سازی بیش از 28.4 درصد در سیستم کشت کلاسیک ES بود که به طور معناداری از سیستم های E8 و mTESR بالاتر بود.
بحث:
تحت هم کشتی با OP9، سلول های iPS می توانند به سلول های بنیادی /پیش ساز خون ساز تمایز یابند که نشان دهنده کارایی بالا زمانی است که iPSها در محیط ES نگهداری شدند.
Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2016 Dec;24(6):1863-1868. doi: 10.7534/j.issn.1009-2137.2016.06.045.
[Effects of Different Culture Systems on the Hematopoietic Differentiation Ability of iPS Cells].
[Article in Chinese]
Fan D1, He WY1, Niu XH1, Ou ZH1, Chen YC1, Sun XF2.
Abstract
OBJECTIVE:
To investigate the in vitro effects of different culture systems on hematopoietic differentiation ability of induced pluripotent stem (iPS) cells.
METHOD:
Two culture systems including E8 and mTESR(freeder-free medium), and the classical ES culture medium were chosen for culture of iPS cells. The iPS cells maintaining in above mentioning culcure systems were co-cultured with OP9 cells(murine bone marrow stromal cells) in vitro to be induced to differentiate into hematopoietic stem/progenitor cells. Flow cytometry and real-time quantitative PCR were used to detect the expression of specific hematopoietic markers and the effects of different culture systems on the differentiation of iPS in vitro.
RESULT:
iPS cultured in the 3 selected medium could be differentiated into hematopoietic stem cells. Efficiency of hematopoietic differentiation was up to 28.4% in classical ES culture system, which was significantly higher than that in E8 and mTESR system.
CONCLUSION:
Under the co-culture with OP9, iPS can differentiate into hematopoietic stem/progenitor cells, which shows higher efficiency when iPS maintained in the ES medium.
PMID: 28024509