تولید سلول های تولید کننده انسولین بوسیله بیش بیان miR-375 در سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی بیماران دیابتی
تاریخ انتشار: جمعه 24 دی 1395
| امتیاز:
دیابت شیرین(DM) یک بیماری سیستماتیک است که به دلیل تخریب جزایر لانگرهانس پانکراسی و مقاومت سیستماتیک به انسولین اتفاق می افتد. فقدان اهدا کننده برای پیوند پانکراس و خطر رد پیوند چالش عمده در درمان این بیماری هستند. سلول های بنیادی منبع کافی و مناسبی برای ایجاد سلول های تولید کننده انسولین(IPC) هستند. در این مطالعه بافت چربی از بیماران دیابتی که متحمل لیپوساکشن شده بودند گرفته شد و سپس سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی آن ها(ADSCs) جداسازی، شناسایی و در نهایت با لنتی ویروس های حاوی miR-375 تیمار شد. بعد از 7،14 و 21 روز از القا، ژن های خاص کلاسترهای شبه جزایر پانکراسی(ILC) مانند انسولین و PDX1 بوسیله RT-PCR ارزیابی شد. در نهایت، ایمنوسیتوشیمی برای ارزیابی این مارکرها در سطح پروتئین مورد استفاده قرار گرفت. نتایج نشان داد که بیان پروتئین و ژن های انسولین و PDX1 به طور معناداری در سلول های بنیادی ترانسداکت شده در مقایسه با گروه کنترل افزایش یافت. طبق این نتایج این می توان نتیجه گرفت که کلاسترهای شبه جزیره ای می تواند با بیش بیان miR-375 از سلول های بنیادی مشتق از چربی بدست آید.
Biologicals. 2016 Dec 22. pii: S1045-1056(16)30156-7. doi: 10.1016/j.biologicals.2016.12.004. [Epub ahead of print]
Insulin producing cells generation by overexpression of miR-375 in adipose-derived mesenchymal stem cells from diabetic patients.
Piran M1, Enderami SE1, Piran M1, Sedeh HS1, Seyedjafari E2, Ardeshirylajimi A3.
Abstract
Diabetes Mellitus (DM) is a systematic disease, which happens because of destruction of islets of Langerhans in the pancreas and systematic resistance to insulin. The lack of donor for pancreas transplantation and risk of transplant rejection is the main challenge in the treatment of this disease. Stem cells are proper and sufficient source for creating insulin-producing cells (IPC). In this study adipose tissue was provided from diabetic patients operated for liposuction and then adipose derived stem cells (ADSCs) were isolated, characterized and then treated by lentiviruses containing miR-375, after 7, 14 and 21 days of induction, islet-like clusters (ILC) specific genes including insulin and PDX1 were evaluated by Real Time RT-PCR. Finally, immunocytochemistry was also used for evaluation of these markers in the protein level. The results were shown that insulin and PDX1 genes and proteins expression significantly increased in transduced stem cells compared to the control group. According to the results it can be concluded that islet-like clusters can be achieved from ADSCs by overexpression of miR-375.
PMID: 28017506