اثر سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بند ناف انسانی روی تکثیر و تمایز سلول های لوکمیایی
تاریخ انتشار: جمعه 24 دی 1395
| امتیاز:
هدف:
بررسی اثر سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بند ناف انسانی(HUC-MSC) روی تکثیر و تمایز NB4 تیمار شده با آل-ترانس اسید رتینوئیک و مکانیسم های دخیل در آن.
روش ها:
سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف انسانی از بند ناف نوزادان جداسازی شد. سیستم هم کشتی بوسیله HUC-MSC و NB4 ایجاد شد. ازمایشات به چهار گروه تقسیم شد: گروه سلول های NB4 به تنهایی، گروه NM( سلول های NB4 هم کشت شده با HUC-MSC)، گروه NA(سلول های NB4 تیمار شده با ATRA) و گروه NMA( گروه سلول های NB4 هم کشت شده با HUC-MSC و تیمار شده با ATRA). سلول های NB4 بوسیله میکروسکوپ شمار شدند و تکثیر NB4 بوسیله سنجش CCK-8 مونیتور شد، تمایز NB4 بوسیله رنگ آمیزی رایت و تست احیای نیتروبلو تترازولیوم ارزیابی شد. سطح اینترلوکین 6 در محیط رویی کشت گروه های مختلف بوسیله کیت الیزا تست شد. برای تشخیص سطح رونویسی CDKN1A، CCND1 و Survivin از qPCR استفاده شد.
نتایج:
سلول های NB4 و HUC-MSC در سیستم های هم کشتی در شرایط خوبی بودند و تکثیر NB4ها تا حدی بوسیله HUC-MSC سرکوب شده بود. سلول های HUC-MSC می توانند در همکاری با ATRA تمایز NB4 را به طور قابل توجهی القا کنند. مطابق با این یافته ها، سطح بیان اینترلوکین6 در گروه های هم کشتی به نحو قابل توجهی در مقایسه با سایر گروه ها یا گروه HUC-MSC به تنهایی بالاتر بود. آنالیزهای PCR کمی نشان داد که سطح بیان mRNAی CDKN1A و CCND1 در گروه های هم کشتی به ترتیب افزایش و کاهش داشته است.
بحث:
هم کشتی HUC-MSC می تواند تکثیر را کاهش دهد اما تمایز سلول های NB4 را افزایش می دهد که پیشنهاد می کند این اثر ممکن است شدیدا با ترشح اینترلوکین6 مرتبط باشد که می تواند بیان برخی فاکتورها را نیز در آزمایشگاه تحت تاثیر قرار دهد.
Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2016 Dec;24(6):1710-1715. doi: 10.7534/j.issn.1009-2137.2016.06.017.
[Effect of Human Umbilical Cord-derived Mesenchymal Stem Cells on Proliferation and Differentiation of Leukemia Cells].
[Article in Chinese]
Ma XH1, Xu X1, Zou CY2, Zhao Y3, Wang ZJ3, Wang HY3, Wang YF1, Hu ZB4.
Abstract
OBJECTIVE:
To investigate the effect of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells(HUC-MSC) on the proliferation and differentiation of NB4 treated with all-trans retinoid acid (ATRA) and its underlining mechanisms .
METHODS:
Human umbilical cord mesenchymal stem cells were isolated from umbilical cord of newborns. Co-culture system was established by HUC-MSC and NB4 in vitro. The experiment was divided into 4 groups: NB4 group (NB4 cells alone) , NM group (NB4 cells co-cultured with HUC-MSC) , NA group (NB4 cells treated with ATRA) , NMA group (NB4 cells co-cultured with HUC-MSC and treated with ATRA) . NB4 cells were counted by a microscopy, NB4 proliferation was monitored by CCK-8 assay, NB4 differentiation was assessed by Wright ' s staining and nitroblue tetrazolium reduction test. IL-6 levels in the culture supernatant of different groups were tested by ELISA kit. Quantitative PCR was used to detect the transcription level of CDKN1A, CCND1 and Survivin.
RESULTS:
NB4 and HUC-MSC in the co-culturing systems were in good condition with a slight repression of NB4 proliferation by HUC-MSC. HUC-MSC could collaborate with ATRA to induce significant NB4 differentiation. Consistent with this finding, IL-6 expression levels of co-cultured groups were remarkably higher than that in any other groups or the group of HUC-MSC alone. The quantitative PCR analysis showed that the levels of CDKN1A and CCND1 mRNA expression were increased or decreased respectively in the co-cultured groups.
CONCLUSION:
HUC-MSC co-culture can reduce proliferation but promote the differentiation of NB4 cells, suggesting that this effect may be closely related with the secretion of IL-6 which can affect the expression of some factors in vitro.
PMID: 28024481