بازسازی بافت پالپ دندان با استفاده از سلول های بنیادی پالپ دندانی جداسازی و تکثیر شده در سروم انسانی
تاریخ انتشار: جمعه 20 اسفند 1395
| امتیاز:
مقدمه:
سلول های بنیادی مشتق از پالپ دندان(DPSCs) به دلیل ظرفیت بازسازی و ویژگی های رگزایی، پتانسیل بازسازی دنتین و بافت پالپ دندانی را دارند. با این حال، به منظور رویکردهای بازسازی کننده برای بدست آوردن مقبولیت قانونی و بالینی، پروتکل هایی برای تعیین آسان ترین راه ها برای کشت سلول های بنیادی مشتق از پالپ دندان و بدون استفاده از اجزای مشتق از جانوران(سروم جانوری) و فاکتورهای رشد زنوژن مورد نیاز است.
روش ها:
در این مطالعه،DPSCهای انسانی از دندان مولر سوم جداسازی شده و در شرایط کشت استاندارد حاوی سروم جنین گاوی(DPSCs-FBS) یا شرایط کشت حاوی سروم انسانی(DPSCs-HS) تکثیر شدند. بعد از ویژگی یابی سلولی و ارزیابی سکرتوم رگزایی آن ها، DPSCها در برش دندان/داربست ها کشت داده شده و به صورت زیر پوستی به موش ناقص از نظر ایمنی ایمپلنت شدند. بعد از 30 روز، برش های دندان مجددا برداشته شده و برای بازسازی بافت پالپ دندانی ارزیابی شدند. ایمونوهیستوشیمی و میکروسکوپ کانفوکال برای کمی سازی تشکیل عروق خونی و ارزیابی تشکیل پره دنتین و دنتین استفاده شد.
نتایج:
بعد از کشت، DPSCs-HS به همان اندازه DPSCs-FBS، غلظت هایی از فاکتورهای رشد رگزا را تولید کردند. علاوه براین، در DPSCs-HS، چندین فاکتور رگزا تولید شدند که در مقایسه با DPSCs-FBS یک برابر غلظت داشتند. در in vivo، مشخص شد که DPSCs-HS یک پاسخ رگزای افزایش یافته و بازسازی دنتین معادل DPSCs-FBS را تولید می کنند.
بحث:
این یافته ها نشان می دهد که DPSCها می توانند در مقیاس بالینی و در محیطی که فاقد سروم جانوری یا فاکتورهای رشد زنوژن باشد جداسازی و تکثیر شوند و این در حالی است که ویژگی های بازسازی کنندگی پالپ دندانی شان را حفظ می کنند. کاربرد این یافته ها برای تکوین بیشتر پروتکل های بالینی با استفاده از DPSCها در درمان های سلولی بارز است.
J Endod. 2017 Feb 16. pii: S0099-2399(16)30968-2. doi: 10.1016/j.joen.2016.11.018. [Epub ahead of print]
Dental Pulp Tissue Regeneration Using Dental Pulp Stem Cells Isolated and Expanded in Human Serum.
Piva E1, Tarlé SA2, Nör JE3, Zou D2, Hatfield E2, Guinn T2, Eubanks EJ2, Kaigler D4.
Abstract
INTRODUCTION:
Dental pulp-derived stem cells (DPSCs) have the potential to regenerate dentin and dental pulp tissue because of their differentiation capacity and angiogenic properties. However, for regenerative approaches to gain regulatory and clinical acceptance, protocols are needed to determine more feasible ways to cultivate DPSCs, namely, without the use of xenogeneic-derived components (animal sera) and exogenous growth factors.
METHODS:
In this study, human DPSCs were isolated from third molars and expanded in standard culture conditions containing fetal bovine serum (DPSCs-FBS) or conditions containing human serum (DPSCs-HS). After cell characterization and evaluation of their angiogenic secretome, DPSCs were seeded in tooth slice/scaffolds and implanted subcutaneously into immunodeficient mice. After 30 days, tooth slices were retrieved and evaluated for dental pulp tissue regeneration. Immunohistochemistry and confocal microscopy were used to quantify blood vessel formation and evaluate predentin and dentin formation.
RESULTS:
After culture, DPSCs-HS produced concentrations of angiogenic growth factors equivalent to DPSCs-FBS. Additionally, in DPSCs-HS, several angiogenic factors were produced in at least 1-fold higher concentrations than in DPSCs-FBS. In vivo, it was determined that DPSCs-HS produced a robust angiogenic response and regeneration of dentin equivalent to DPSCs-FBS.
CONCLUSIONS:
These findings show that DPSCs can be isolated and expanded to clinical scale numbers in media devoid of animal serum or exogenous growth factors and still maintain their pulp regenerative properties. The implications of these findings are significant for further development of clinical protocols using DPSCs in cell therapies.
Copyright © 2016 American Association of Endodontists. Published by Elsevier Inc. All rights reserved.
PMID: 28216268