آنالیز ترانسکریپتوم تمایز سلول های شبه بتای پانکراسی مشتق از سلول های بنیادی پرتوان القایی(iPSC)
تاریخ انتشار: شنبه 26 فروردین 1396
| امتیاز:
دیابت میلیون ها فرد را در سراسر دنیا تحت تاثیر قرار می دهد و جایگزینی سلول های بتا یک استراتژی امیدوار کننده است. سلول های بنیادی پرتوان القایی(iPSCs) می توانند به هر نوع سلولی از جمله سلول های بتای پانکراس تمایز یافند و یک تیمار درمانی خوب را برای دیابت ارائه دهند. با این حال، مکانیسم های مولکولی دخیل در تمایز سلول های بتای مشتق از iPSCها مشخص نیست. در این جا، ما سلول های شبه بتای پانکراسی را از iPSCهای موشی بوسیله یک پروتکل سه مرحله ای تولید کردیم و برای رسیدن به یک چشم انداز رونویسی سلول های شبه بتای پانکراسی مشتق از iPSC طی دوره تمایز گزینشی، توالی یابی عمیق RNA انجام دادیم. سپس ما روی ژن های به صورت افتراقی بیان شده در دوره زمانی در دوره تمایزی فوکوس کردیم و این ژن ها متحمل آنالیز تفسیر GOو مسیر KEGG شدند. علاوه براین، شبکه های عمل ژنی نیز برای این ژن های به صورت افتراقی بیان شده ایجاد شد و بیان ژن های اساسی بوسیله qRT-PCR تشخیص داده شد که به خوبی با RNA-Seq مرتبط بود. به طور کلی، مطالعه ما اطلاعات ارزشمندی را با توجه به تغییرات ترانسکریپتوم در سلول های بتای مشتق از iPSC ها طی تمایز ارائه می کند که فرایندها و مسیرهای زیستی دخیل در تمایز سلول های بتا را نشان می دهد و شناسایی و آنالیز عملکری ژن های بالقوه ای که می توانند برای بهود تولید سلول های بتای دارای عملکرد از iPSCها استفاده شوند را افزایش می دهد.
Cell Transplant. 2017 Mar 28. doi: 10.3727/096368917X695399. [Epub ahead of print]
Transcriptome analysis of the induced pluripotent stem cell (iPSC)-derived pancreatic β-like cell differentiation.
Huang Y1, Wan J1, Guo Y2, Zhu S1, Wang Y1, Wang L1, Guo Q1, Lu Y1, Wang Z1.
Abstract
Diabetes affects millions of people worldwide and β cell replacement is one of the promising strategies. Induced pluripotent stem cells (iPSCs) could differentiate intoany cell type, including pancreatic β cells, providing a well treatment therapy for diabetes. However, the molecular mechanisms underlying the differentiation of iPSC-derived β cells were not clear. Here, we generated pancreatic β-like cells frommouse iPSCs by a three-stage protocol and performed deep RNA sequencing to get a transcriptional landscape of iPSC-derived pancreatic β-like cells during the selective differentiation period. We then focused on the differentially expressed genes during the time course in differentiation period and these genes were underwent GO annotation and KEGG pathway analysis. In addition, gene act networks were also constructed for these differentially expressed genes and the expression of pivotalgenes detected by quantitative real-time PCR was well-correlated with RNA-Seq. Overall, our study provides valuable information regarding the transcriptome changes in β cells derived from iPSCs during differentiation, elucidates the biological processand pathways underlying β cell differentiation and promotes identification and functional analysis of potential genes that could be used for improving functional βcell generation from iPSCs.
PMID: 28387177