خصوصیت یابی پیشرفته و مقرون به صرفه سلول های بنیادی پرتوان القایی
تاریخ انتشار: شنبه 16 اردیبهشت 1396
| امتیاز:
بازبرنامه ریزی سلول های سوماتیک به سلول های بنیادی پرتوان القایی(iPSCs) امکان مطالعه مکانیسم های مولکولی دخیل در بیماری های انسانی و انواع سلول ها مانند نورون ها و کاردیومیوسیت ها که استخراج آن ها از بیماران زنده مشکل است را فراهم می آورد. امروزه، مطالعاتی منتشر شده است که از پانل های کوچک رده های سلولی مشتق از iPSCها برای مطالعه بیماری های منوژن استفاده کرده اند. با این حال، برای مطالعه بیماری های پیچیده، جایی که تنوع ژنتیکی دخیل در اختلال و بیماری ناشناخته است، نیاز به تعداد قابل توجهی از رده های iPSC خاص بیماران و کنترل است که تولید شوند.در حال حاضر روش های موجود برای تولید و ویژگی یابی iPSCها زمان بر، گران و در برخی موارد کیفی است و کمی نمی باشد. در این جا، روش های ساده ای را ارائه کرده ایم که هزینه را کاهش می دهند و توانایی شناسایی رده های iPSC را افزایش دهند. به ویژه، ما روش هایی را برای کمی سازی عملکردی مارکرهای سطحی، آنالیزهای بیان ژن پتانسیل تمایزی آزمایشگاهی و ارزیابی کاریوتیپ با هزینه کاهش یافته، ارائه کرده ایم.
Stem Cell Reports. 2017 Apr 11;8(4):1101-1111. doi: 10.1016/j.stemcr.2017.03.011.
High-Throughput and Cost-Effective Characterization of Induced Pluripotent Stem Cells.
D'Antonio M1, Woodruff G2, Nathanson JL2, D'Antonio-Chronowska A3, Arias A1, Matsui H3, Williams R3, Herrera C2, Reyna SM2, Yeo GW4, Goldstein LSB5, Panopoulos AD6, Frazer KA7.
Abstract
Reprogramming somatic cells to induced pluripotent stem cells (iPSCs) offers the possibility of studying the molecular mechanisms underlying human diseases in cell types difficult to extract from living patients, such as neurons and cardiomyocytes. To date, studies have been published that use small panels of iPSC-derived cell lines to study monogenic diseases. However, to study complex diseases, where the genetic variation underlying the disorder is unknown, a sizable number of patient-specific iPSC lines and controls need to be generated. Currently the methods for deriving and characterizing iPSCs are time consuming, expensive, and, in some cases, descriptive but not quantitative. Here we set out to develop a set of simple methods that reduce cost and increase throughput in the characterization of iPSC lines. Specifically, we outline methods for high-throughput quantification of surface markers, gene expression analysis of in vitro differentiation potential, and evaluation of karyotype with markedly reduced cost.
PMID: 28410643