مطالعه ای مقایسه ای برای ارزیابی پتانسیل تمایز عضله زایی سلول های بنیادی مزانشیمی کوریون انسانی در برابر سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف
تاریخ انتشار: جمعه 26 خرداد 1396
| امتیاز:
هدف:
بیماری های تخریب کننده عضلاتی زندگی بسیاری از بیماران را در جهان تهدید می کند. از آن جایی که تجویز دارو در بازسازی بافت آسیب دیده کافی نیست، سلول درمانی به عنوان یک استراتژی مناسب برای احیای سلول های از دست رفته در نظر گرفته شده است. از آن جایی که کارایی پتانسیل تمایز عضله زایی(میوژنیک) سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از کوریون انسانی(C-MSCs) تا کنون نشان داده نشده است، ما به ارزیابی ویژگی های تمایز عضله ای این سلول ها در مقایسه با سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف در حضور 5-آزاسیتیدین پرداخته ایم.
مواد و روش ها:
برای این امر، خون بند ناف جفت نوزادان به آزمایشگاه منتقل شد. بعد از ویژگی یابی سلول های جداسازی شده با استفاده از فلوسایتومتری و ظرفیت تمایز چند رده ای، سلول های بنیادی مزانشیمی بدست آمده در DMEM/F12 کامل شده با دو درصد FBS و 10 میکرولیتر 5- آزاسیتیدین برای القای تمایز عضله زایی کشت شدند.
نتایج:
داده های ما نشان داد که C-MSCها و UCB-MSCها از نظر مورفولوژی دوکی شکل هستند. آن ها برای آنتی ژن های CD90، CD73 و CD44 مثبت بودند و برای مارکرهای خون سازی منفی بودند. هم چنین آن ها به رده های استخوانی و چربی تمایز یافتند. نتایج Real-time PCR نشان داد که سلول ها می توانند MyoD، دسمین و α-MHC را در انتهای هفته اول بیان کنند(P<0.05). بیش بیان معناداری در بیان GATA-4 در هر دو گروه مشاهده نشد. رنگ آمیز ایمنوسیتوشیمی بیان دسمین، cTnT و α-MHC را آشکار ساخت.
جمع بندی:
نتایج نشان داد که این سلول ها پتانسیل تمایز به سلول های شبه میوبلاستی را دارند. بیش بیان برخی از مارکرهای عضله زایی(دسمین، α-MHC) در سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از کوریون در مقایسه با سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف مشاهده شد.
Tissue Cell. 2017 May 11. pii: S0040-8166(17)30001-0. doi: 10.1016/j.tice.2017.05.003. [Epub ahead of print]
A Comparative Study to Evaluate Myogenic Differentiation Potential of Human Chorion versus Umbilical Cord Blood-derived Mesenchymal Stem Cells.
Bana N1, Sanooghi D2, Soleimani M3, Hayati Roodbari N1, Alavi Moghaddam S1, Joghataei MT4, Sayahpour FA5, Faghihi F6.
Abstract
OBJECTIVE:
Musculodegenerative diseases threaten the life of many patients in the world. Since drug administration is not efficient in regeneration of damaged tissues, stem cell therapy is considered as a good strategy to restore the lost cells. Since the efficiency of myogenic differentiation potential of human Chorion- derived Mesenchymal Stem Cells (C-MSCs) has not been addressed so far; we set out to evaluate myogenic differentiation property of these cells in comparison with Umbilical Cord Blood- derived Mesenchymal Stem Cells (UCB-MSCs) in the presence of 5-azacytidine.
MATERIALS & METHODS:
To do that, neonate placenta Umbilical Cord Blood were transferred to the lab. After characterization of the isolated cells using flowcytometry and multilineage differentiation capacity, the obtained Mesenchymal Stem Cells were cultured in DMEM/F12 supplemented with 2% FBS and 10μM of 5-azacytidine to induce myogenic differentiation. Real-time PCR and immunocytochemistry were used to assess the myogenic properties of the cells.
RESULTS:
Our data showed that C-MSCs and UCB-MSCs were spindle shape in morphology. They were positive for CD90, CD73 and CD44 antigens, and negative for hematopoietic markers. They also differentiated into osteoblast and adipoblast lineages. Real-time PCR results showed that the cells could express MyoD, desmin and α-MHC at the end of the first week (P<0.05). No significant upregulation was detected in the expression of GATA-4 in both groups. Immunocytochemical staining revealed the expression of Desmin, cTnT and α-MHC.
CONCLUSIONS:
Results showed that these cells are potent to differentiate into myoblast- like cells. An upregulation in the expression of some myogenic markers (desmin, α- MHC) was observed in C-MSCs in comparison with UCB-MSCs.
PMID: 28601197