داربست های نانوفیبری سه بعدی برای تکثیر ex vivoسلول های بنیادی خون ساز خون بند ناف
تاریخ انتشار: یکشنبه 25 تیر 1396
| امتیاز:
سلول های بنیادی خون ساز(HSC) خون بند ناف منبعی جایگزین برای پیوند سلول های بنیادی خون ساز است. تعداد محدود سلول ها، کاربردهای درمانی این سلول ها در مقیاس بالینی را محدود می کند. هدف این مطالعه تکثیر ex vivo سلول های بنیادی خون ساز خون بند ناف در یک داربست نانوفیبری پلی کاپرولاکتون(PCL) سه بعدی پوشیده شده با فیبرونکتین(FN) بود. ابتدا، ما سلول های CD34+ خون بند ناف را جداسازی کردیم و آن ها را به مدت 10 روز در حضور فاکتورهای رشد کشت دادیم. ارزیابی ها بوسیله qRT-PCR، فلوسایتومتری و کلونی زایی صورت گرفت. داربست نانوفیبری سه بعدی PCL پوشیده شده با فیبرونکتین سلول های هسته دار و سلول های CD34+ به طور قابل ملاحظه ای بیشتری را تولید کردند(p < .05) و در مقایسه با کشت سلولی دو بعدی و قبل از تکثیر میزان ژن های خانه گزینی و خودنوزایی به طور قابل ملاحظه بالاتری داشتند(p < .05). بیان ژن های CXCR-4، VLA-4، VLA-5 و LFA-1 و هم چنین HOXB-4، HOXA-9، BMI-1 و hTERT در سه بعدی بالاتر از دو بعدی بود. مارکرهای CD13، CD14، CD33، CD34 و CD45 به طور قابل توجه ای بالاتر بود و مارکرهای CD2، CD3 و CD19 به طور قابل توجهی در داربست های سه بعدی در مقایسه با کشت سلولی دو بعدی پایین تر بود(p < .05). نوع و تعداد کلونی ها در کشت دو بعدی در مقایسه با محیط کشت سه بعدی پایین تر بود(p > .05). داربست نانو PCL سه بعدی پوشیده شده با فیبرونکتین می تواند بعد از تکثیر، خودنوزایی و خانه گزینه ای سلول های بنیادی خون ساز خون بند ناف را به نحو بهتری حفظ کند.
Artif Cells Nanomed Biotechnol. 2017 Jul 7:1-9. doi: 10.1080/21691401.2017.1337026. [Epub ahead of print]
3-Dimensional nano-fibre scaffold for ex vivo expansion of cord blood haematopoietic stem cells.
Mousavi SH1, Abroun S2, Soleimani M2, Mowla SJ3.
Abstract
Cord blood (CB) haematopoietic stem cell (HSC) is an alternative source of HSC transplantation. The limited cell number greatly restricts their clinic-scale therapeutic applications. The objective of this study was an ex vivo expansion of CB HSCs in a new three-dimensional polycaprolactone nano-scaffold coated with fibronectin (FN). First, we isolated CB CD34+ cells and cultured 10 days in presence of growth factors. The evaluation was performed by qRT-PCR, flow cytometry and clonogenicity. 3D PCL nano-scaffold coated with FN produced significantly higher total nucleated cells and CD34+ cells (p < .05) and also had significantly higher homing and self-renewality genes than 2D cell culture and before expansion (p < .05). The expression of CXCR-4, VLA-4, VLA-5 and LFA-1, and also HOXB-4, HOXA-9, BMI-1 and hTERT genes was higher in 3D than 2D. The CD13, CD14, CD33, CD34 and CD45 markers were significantly higher and CD2, CD3 and CD19 markers were significantly lower in 3D scaffold than 2D cell culture (p < .05). The type and number of colonies in 2D culture were lower than 3D culture medium (p > .05). 3D PCL nano-scaffold coated with FN could better keep specifications homing and self renewality of CB HSCs after expansion.
PMID: 28685587