مقایسه بیان ژن های کبدی بوسیله سلول های بنیادی مزانشیمی ژله وارتوان انسانی در سیستم های کشت کلاژنی دو و سه بعدی
تاریخ انتشار: شنبه 07 مرداد 1396
| امتیاز:
پیشینه:
سلول های بنیادی مزانشیمی ژله وارتون انسانی(HWJMSCs) مارکرهای خاص کبد مانند آلبومین، آلفا فیتوپروتئین، سیتوکراتین 19، سیتوکراتین 18 و گلوکز 6-فسفات را بیان می کنند. بنابراین، آن ها می توانند به عنوان منبعی خوب برای درمان های جایگزین سلول برای بیماری های کبدی در نظر گرفته شوند. این مطالعه در نظر دارد که اثرات سیستم های کشت مختلف را روی الگوری بیان ژن های خاص هپاتوسیتی در HWJMSCها ارزیابی کند.
روش ها:
سلول های HWJMSC با تشخیص مارکرهای سطحی(CD) و قابلیت تمایز به استئوبلاست ها و استئوسیت ها به عنوان سلول های بنیادی مزانشیمی شناخته شدند. این سلول ها در نوارهای کلاژنی دو بعدی و داربست های کلاژنی سه بعدی برای 21 روز کشت داده شدند و با کشت های کنترل مقایسه شدند. برای ارزیابی بیان ژن های خاص کبدی Real time RT-PCR استفاده شد.
نتایج:
سلول های HWJMSC که روی پلیت های کشت غیر پوشیده رشد کردند سیتوکراتین 18 و 19، آلفا-فیتوپروتئین، آلبومین و گلوکز6-فسفات و کلاودین را بیان کردند. بیان فاکتور 4 هسته ای هپاتیکی(HNF4) بسیار پایین بود. این سلول ها زمانی که در داربست های کلاژنی سه بعدی کشت داده شدند افزایش قابل توجهی را در بیان کلاودین در مقایسه با کشت های تک لایه معمولی و داربست کلاژنی دو بعدی نشان دادند.
جمع بندی:
سیستم های کشت مختلف روی بیان مارکرهای خاص هپاتوسیتی بوسیله HWJMSC ها(بجز کلاودین) ندارند. بیان کلاودین نشان داد که داربست کلاژنی سه بعدی ماتریکس خارج سلولی را برای القای سلول ها برای تماس با خودشان و سایر سلول ها فراهم می کند.Collagen; Hepatocyte; Mesenchymal stem cell; Scaffold; Wharton jelly
Iran J Med Sci. 2016 Jan;41(1):28-36.
Comparison of the Expression of Hepatic Genes by Human Wharton's Jelly Mesenchymal Stem Cells Cultured in 2D and 3D Collagen Culture Systems.
Khodabandeh Z1, Vojdani Z2, Talaei-Khozani T3, Jaberipour M4, Hosseini A4, Bahmanpour S2.
Abstract
BACKGROUND:
Human Wharton's jelly mesenchymal stem cells (HWJMSCs) express liver-specific markers such as albumin, alpha-fetoprotein, cytokeratin-19, cytokeratin-18, and glucose-6-phosphatase. Therefore, they can be considered as a good source for cell replacement therapy for liver diseases. This study aimed to evaluate the effects of various culture systems on the hepatocyte-specific gene expression pattern of naïve HWJMSCs.
METHODS:
HWJMSCs were characterized as MSCs by detecting the surface CD markers and capability to differentiate toward osteoblast and adipocyte. HWJMSCs were cultured in 2D collagen films and 3D collagen scaffolds for 21 days and were compared to control cultures. Real time RT-PCR was used to evaluate the expression of liver-specific genes.
RESULTS:
The HWJMSCs which were grown on non-coated culture plates expressed cytokeratin-18 and -19, alpha-fetoprotein, albumin, glucose-6-phosphatase, and claudin. The expression of the hepatic nuclear factor 4 (HNF4) was very low. The cells showed a significant increase in caludin expression when they cultured in 3D collagen scaffolds compared to the conventional monolayer culture and 2D collagen scaffold.
CONCLUSION:
Various culture systems did not influence on hepatocyte specific marker expression by HWJMSCs, except for claudin. The expression of claudin showed that 3D collagen scaffold provided the extracellular matrix for induction of the cells to interconnect with each other.
PMID: 26722142