استفاده مجدد از محصولات خونی به عنوان مکملی جایگزین در بهینه سازی کشت سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی با درجه بالینی
تاریخ انتشار: شنبه 28 مرداد 1396
| امتیاز:
هدف:
سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی(ADMSCs) استراتژی امیدوار کننده ای برای کاربردهای ارتوپدی بویژه در ترمیم استخوان هستند. تکثیر Ex vivo سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی برای بدست آوردن تعداد سلول کافی مورد نیاز است. مکمل های زنوژن به منظور کاهش خطر عفونت و واکنش های ایمنی زا باید به حداقل برسد. عصاره پلاکت انسانی(HPL) و پلاسمای انسانی(Hplasma) ممکن است منبع ایده آلی برای تکثیر ADMSCها باشند. در مطالعه حاضر، استفاده از محصولات خونی بعد از تاریخ انتقال توصیه شده آن ها، برای آماده سازی عصاره پلاکتی انسانی(HPL) و پلاسمای انسانی(Hplasma) برای تکثیر کشت آزمایشگاهی و استخوان زایی ADMSCها ارزیابی شد.
روش ها:
سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی انسانی در محیط کامل شده با HPL، پلاسمای انسانی و ترکیبی از HPL و پلاسمای انسانی کشت داده شد. ویژگی های این ADMSCها، از جمله استخوان زایی، در مقایسه با آنهایی که با سروم جنینی گاو کشت داده شده بودند ارزیابی شد.
نتایج:
عصاره پلاکت انسانی(HPL) و HPL+Hplasma اثر پیش برنده رشد قابل توجه تری را در مقایسه با FBS دارند و این در حالی است که Hplasma اثر پیش برنده رشد مشابه با FBS نشان می دهد. سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی انسانی کشت شده درHPL و/یا Hplasma در مقایسه با آن هایی که در حضور FBSکشت شدند، فیبروبلاست های واحد شکل دهنده کلونی بیشتری تولید کردند. بعد از کشت طولانی مدت، ADMSCهای کشت شده در HPL و/یا Hplasma پیری سلولی کاهش یافته ای را نشان ادند، فنوتیپ های تیپیک سلولی و ظرفیت تمایز به رده های خاص استخوانی و چربی را حفظ کردند.
جمع بندی:
عصاره پلاکت انسانی و پلاسمای انسانی تهیه شده از محصولات خونی بعد از تاریخ انتقال توصیه شده، می توانند به عنوان منبعی جایگزین و موثر برای تکثیر ex vivo وسیع سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی استفاده شوند.
Bone Joint Res. 2017 Jul;6(7):414-422. doi: 10.1302/2046-3758.67.BJR-2016-0342.R1.
Re-using blood products as an alternative supplement in the optimisation of clinical-grade adipose-derived mesenchymal stem cell culture.
Phetfong J1, Tawonsawatruk T2, Seenprachawong K3, Srisarin A3, Isarankura-Na-Ayudhya C4, Supokawej A5.
Abstract
OBJECTIVES:
Adipose-derived mesenchymal stem cells (ADMSCs) are a promising strategy for orthopaedic applications, particularly in bone repair. Ex vivo expansion of ADMSCs is required to obtain sufficient cell numbers. Xenogenic supplements should be avoided in order to minimise the risk of infections and immunological reactions. Human platelet lysate and human plasma may be an excellent material source for ADMSC expansion. In the present study, use of blood products after their recommended transfusion date to prepare human platelet lysate (HPL) and human plasma (Hplasma) was evaluated for in vitro culture expansion and osteogenesis of ADMSCs.
METHODS:
Human ADMSCs were cultured in medium supplemented with HPL, Hplasma and a combination of HPL and Hplasma (HPL+Hplasma). Characteristics of these ADMSCs, including osteogenesis, were evaluated in comparison with those cultured in fetal bovine serum (FBS).
RESULTS:
HPL and HPL+Hplasma had a significantly greater growth-promoting effect than FBS, while Hplasma exhibited a similar growth-promoting effect to that of FBS. ADMSCs cultured in HPL and/or Hplasma generated more colony-forming unit fibroblasts (CFU-F) than those cultured in FBS. After long-term culture, ADMSCs cultured in HPL and/or Hplasma showed reduced cellular senescence, retained typical cell phenotypes, and retained differentiation capacities into osteogenic and adipogenic lineages.
CONCLUSION:
HPL and Hplasma prepared from blood products after their recommended transfusion date can be used as an alternative and effective source for large-scale ex vivo expansion of ADMSCs.Cite this article: J. Phetfong, T. Tawonsawatruk, K. Seenprachawong, A. Srisarin, C. Isarankura-Na-Ayudhya, A. Supokawej. Re-using blood products as an alternative supplement in the optimisation of clinical-grade adipose-derived mesenchymal stem cell culture. Bone Joint Res 2017;6:414-422. DOI: 10.1302/2046-3758.67.BJR-2016-0342.R1.
PMID: 28720606