مطالعه ای مقایسه ای برای ارزیابی پتانسیل تمایز میوژنیک سلول های بنیادی مزانشیمی کوریون انسانی در برابر سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف
تاریخ انتشار: شنبه 28 مرداد 1396
| امتیاز:
هدف:
بیماری های مخرب عضلانی تهدید کننده حیات بسیاری از بیماران در دنیا است. از آن جایی که استفاده از داروها در بازسازی بافت های آسیب دیده موثر نیست، سلول درمانی به عنوان استراتژی مناسبی برای احیای سلول های از دست رفته محسوب می شود. از آن جایی که کارایی پتانسیل تمایز میوژنیک سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از کوریون انسانی(C-MSCs) تاکنون مورد توجه قرار نگرفته است؛ ما به دنبال ارزیابی ویژگی تمایز میوژنیک این سلول ها در مقایسه با سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف(UCB-MSCs) در حضور 5-آزاسیتیدین هستیم.
مواد و روش ها:
به این منظور، خون بند ناف جفتی نوزاد به آزمایشگاه منتقل شد. بعد از ویژگی یابی سلول های جداسازی شده با استفاده از فلوسایتومتری و ظرفیت تمایز چند رده ای، سلول های بنیادی مزانشیمی بدست آمده در DMEM/F12 کامل شده با FBS دو درصد و ده میکرو مولار 5-آزاسیتیدین برای القای تمایز میوژنیک القایی کشت شدند. ایمنوسیتوشیمی و Real-time PCR برای ارزیابی ویژگی میوژنیک سلول ها استفاده شد.
نتایج:
داده های ما نشان داد که C-MSCها و UCB-MSCها از نظر مورفولوژی شکل دوکی دارند. آن ها برای آنتی ژن CD90، CD73 و CD44 مثبت و برای مارکرهای خون ساز منفی بودند. هم چنین آن ها به رده های استئوبلاستی و آدیپوبلاستی تمایز یافتند. نتایج Real-time PCR نتایج نشان داد که سلول ها می توانند در انتهای هفته اول MyoD ، دسمین و α-MHC را بیان می کنند (P<0.05). هیچ افزایش بیان قابل توجهی در بیان GATA-4در هر دو گروه مشاهده نشد. رنگ آمیزی ایمنوسیتوشیمی بیان دسمین، cTnT و α-MHC را نشان داد.
جمع بندی:
نتایج نشان داد که این سلول ها برای تمایز به سلول های شبه میوبلاستی پتانسیل دارند. افزایش بیان برخی از مارکرهای میوژنیک(دسمین و α-MHC) در C-MSC در مقایسه با UCB-MSCsمشاهده شد.
Tissue Cell. 2017 May 11. pii: S0040-8166(17)30001-0. doi: 10.1016/j.tice.2017.05.003. [Epub ahead of print]
A Comparative Study to Evaluate Myogenic Differentiation Potential of Human Chorion versus Umbilical Cord Blood-derived Mesenchymal Stem Cells.
Bana N1, Sanooghi D2, Soleimani M3, Hayati Roodbari N1, Alavi Moghaddam S1, Joghataei MT4, Sayahpour FA5, Faghihi F6.
Abstract
OBJECTIVE:
Musculodegenerative diseases threaten the life of many patients in the world. Since drug administration is not efficient in regeneration of damaged tissues, stem cell therapy is considered as a good strategy to restore the lost cells. Since the efficiency of myogenic differentiation potential of human Chorion- derived Mesenchymal Stem Cells (C-MSCs) has not been addressed so far; we set out to evaluate myogenic differentiation property of these cells in comparison with Umbilical Cord Blood- derived Mesenchymal Stem Cells (UCB-MSCs) in the presence of 5-azacytidine.
MATERIALS & METHODS:
To do that, neonate placenta Umbilical Cord Blood were transferred to the lab. After characterization of the isolated cells using flowcytometry and multilineage differentiation capacity, the obtained Mesenchymal Stem Cells were cultured in DMEM/F12 supplemented with 2% FBS and 10μM of 5-azacytidine to induce myogenic differentiation. Real-time PCR and immunocytochemistry were used to assess the myogenic properties of the cells.
RESULTS:
Our data showed that C-MSCs and UCB-MSCs were spindle shape in morphology. They were positive for CD90, CD73 and CD44 antigens, and negative for hematopoietic markers. They also differentiated into osteoblast and adipoblast lineages. Real-time PCR results showed that the cells could express MyoD, desmin and α-MHC at the end of the first week (P<0.05). No significant upregulation was detected in the expression of GATA-4 in both groups. Immunocytochemical staining revealed the expression of Desmin, cTnT and α-MHC.
CONCLUSIONS:
Results showed that these cells are potent to differentiate into myoblast- like cells. An upregulation in the expression of some myogenic markers (desmin, α- MHC) was observed in C-MSCs in comparison with UCB-MSCs.
PMID: 28601197