مقایسه شرایط کشت مختلف برای تمایز سلول های عضلانی صاف از سلول های پیرامون عروقیCD146+ سیاهرگ بند ناف انسانی
تاریخ انتشار: یکشنبه 12 شهریور 1396
| امتیاز:
پری سیت ها سلول های پیرامون عروقیCD146+ هستند که ظرفیت تمایز چند توانی همانند سلول های بنیادی مزانشیمی دارند. در کنار نقش های حیاتی آن ها در تکوین عروق و تنظیم جریان خون، آن ها توانایی تمایز به انواع سلول های عروقی را در in vivo دارا هستند. این ویژگی ها پری سیت ها را سلول های مناسبی در زمینه مهندسی بافت عروقی معرفی می کند. محیط کشت برای تمایز آزمایشگاهی پری سیت ها به سلول های عضلانی صاف عروقی(SMCها) تاکنون معرفی نشده است. هدف این مطالعه سعی در تست کردن محیط های کشت برای تمایز سلول های عضلانی صاف از پری سیت های CD146+ بوده است. به این منظور، پری سیت های CD146+ از سیاهرگ بند ناف انسانی جداسازی شدند. سپس آن ها بوسیله رنگ آمیزی ایمنوفلورسنس و فلوسایتومتری ویژگی یابی شدند. سه محیط کشت شامل 1) TGFβ1+BMP4 2) TGFβ1+ال- اسید آسکوربیک 3) سروم اسب، برای تمایز پری سیت های CD146+ به سلول های عضلانی صاف بوسیله IFS و RT-PCR ارزیابی شدند. در نتیجه، در مورد تمایز سلول های عضلانی صاف از پری سیت های CD146+، محیط کشت ثانویه شامل TGFβ1 و ال- اسکوربیک اسید به نظر در مقایسه با دو محیط کشت دیگر موثرتر آمد. این نتایج برای ایجاد یک شرایط کشت مناسب برای تمایز آزمایشگاه سلول های عضلانی صاف از پری سیت های CD146+ مهم است.
Cell Tissue Bank. 2017 Aug 16. doi: 10.1007/s10561-017-9656-z. [Epub ahead of print]
Comparison of different culture conditions for smooth muscle cell differentiation of human umbilical cord vein CD146+ perivascular cells.
Gökçinar-Yagci B1,2, Çelebi-Saltik B3,4.
Abstract
Pericytes are CD146+ perivascular cells (PCs) that have multipotential differentiation capacity as mesenchymal stem cells. Beside their crucial roles in vascular development and blood flow regulation, they have ability to differentiate into vascular cell types in vivo. These properties make pericytes preferred cells in the field of vascular tissue engineering. Culture medium for in vitro differentiation of pericytes to vascular smooth muscle cells (SMCs) has not been defined yet. The aim of this study is to try different culture media for SMC differentiation of CD146+ PCs. For this purpose, CD146+ PCs were isolated from human umbilical cord vein. Then they were characterized by immunofluorescence staining and flow cytometric analysis. Three different culture media including; (1) Transforming growth factor beta 1 (TGF-β1)+ bone morphogenic protein 4, (2) TGF-β1+ L-ascorbic acid (L-AA) and (3) Horse serum, were compared for differentiation of CD146+ PCs to SMCs by IFS and real time polymerase chain reaction. As a result, in the case of SMC differentiation of CD146+ PCs, second culture medium including TGF-β1 and L-AA was found to be more effective than other two media. These results are important for establishing proper culture conditions for in vitro SMC differentiation of CD146+ PCs.
PMID: 28815333