استفاده مجدد محصولات خونی به عنوان یک مکمل جایگزین در بهینه سازی کشت سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی با درجه بالینی
تاریخ انتشار: چهارشنبه 22 شهریور 1396
| امتیاز:
اهداف:
سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی(ADMSCs) استراتژی امیدوار کننده ای برای کاربردهای ارتوپدی بویژه در ترمیم استخوان هستند. تکثیر Ex vivo ADMSCها برای بدست آوردن شمار سلول کافی مورد نیاز است. مکمل های مشتق از جانوران برای به حداقل رساندن خطر آلودگی ها و واکنش های ایمنی باید استفاده نشوند. عصاره پلاکت انسانی و پلاسمای انسانی ممکن است یک منبع عالی برای تکثیر ADMSCها باشند. در مطالعه حاضر، استفاده از محصولات خونی بعد از تاریخ انتقال توصیه شده(تاریخ انقضا) برای آماده سازی عصاره پلاکتی انسانی (HPL) و پلاسمای انسانی(Hplasma) برای تکثیر آزمایشگاهی و استخوان زایی ADMSCها استفاده شد.
روش ها:
سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی انسانی در محیط کامل شده با HPL، Hplasma و ترکیبی از HPL و Hplasmaیا(HPL+Hplasma) کشت شدند. ویژگی های این ADMSCها مانند استخوان زایی، در مقایسه با آن هایی که در حضور سروم جنینی گاو(FBS) کشت شده بودند، ارزیابی شد.
نتایج:
HPL و HPL+Hplasma اثر پیش برنده رشد به طور قابل توجه بالاتری در مقایسه با FBS داشتند، در حالی که Hplasma اثر پیشبرنده رشدی مشابه با FBS نشان داد. ADMSCهای کشت شده در HPL و/یا Hplasma فیبروبلاست های واحد تشکیل دهنده کلونی(CFU-F) بیشتری را در مقایسه با آن هایی که در حضور FBS کشت شده بودند، نشان دادند. بعد از کشت طولانی مدت، ADMSCها کشت شده در HPL و/یا Hplasma پیری سلولی کاهش یافته تری را نشان دادند و فنوتیپ های سلولی خاص را حفظ کرده و ظرفیت تمایزی شان به رده های استخوانی و چربی را حفظ کردند.
جمع بندی:
HPL و Hplasma آماده شده از محصولات خونی بعد از تاریخ انتقال توصیه شده شان(تاریخ انقضا) می توانند به عنوان منبعی جایگزین و موثر برای تکثیر ex vivo در مقایسه وسیع ADMSCها استفاده شوند.
Bone Joint Res. 2017 Jul;6(7):414-422. doi: 10.1302/2046-3758.67.BJR-2016-0342.R1.
Re-using blood products as an alternative supplement in the optimisation of clinical-grade adipose-derived mesenchymal stem cell culture.
Phetfong J1, Tawonsawatruk T2, Seenprachawong K3, Srisarin A3, Isarankura-Na-Ayudhya C4, Supokawej A5.
Abstract
OBJECTIVES:
Adipose-derived mesenchymal stem cells (ADMSCs) are a promising strategy for orthopaedic applications, particularly in bone repair. Ex vivo expansion of ADMSCs is required to obtain sufficient cell numbers. Xenogenic supplements should be avoided in order to minimise the risk of infections and immunological reactions. Human platelet lysate and human plasma may be an excellent material source for ADMSC expansion. In the present study, use of blood products after their recommended transfusion date to prepare human platelet lysate (HPL) and human plasma (Hplasma) was evaluated for in vitro culture expansion and osteogenesis of ADMSCs.
METHODS:
Human ADMSCs were cultured in medium supplemented with HPL, Hplasma and a combination of HPL and Hplasma (HPL+Hplasma). Characteristics of these ADMSCs, including osteogenesis, were evaluated in comparison with those cultured in fetal bovine serum (FBS).
RESULTS:
HPL and HPL+Hplasma had a significantly greater growth-promoting effect than FBS, while Hplasma exhibited a similar growth-promoting effect to that of FBS. ADMSCs cultured in HPL and/or Hplasma generated more colony-forming unit fibroblasts (CFU-F) than those cultured in FBS. After long-term culture, ADMSCs cultured in HPL and/or Hplasma showed reduced cellular senescence, retained typical cell phenotypes, and retained differentiation capacities into osteogenic and adipogenic lineages.
CONCLUSION:
HPL and Hplasma prepared from blood products after their recommended transfusion date can be used as an alternative and effective source for large-scale ex vivo expansion of ADMSCs.Cite this article: J. Phetfong, T. Tawonsawatruk, K. Seenprachawong, A. Srisarin, C. Isarankura-Na-Ayudhya, A. Supokawej. Re-using blood products as an alternative supplement in the optimisation of clinical-grade adipose-derived mesenchymal stem cell culture. Bone Joint Res 2017;6:414-422. DOI: 10.1302/2046-3758.67.BJR-2016-0342.R1.
PMID: 28720606