اندازه گیری شکل فعال و خاموش عفونت سیتومگالوویروسی انسانی در اهدا کننده های خون بند ناف بوسیله Real-Time PCR
تاریخ انتشار: ﺳﻪشنبه 04 مهر 1396
| امتیاز:
پیشینه:
تصور می شود که خون بند ناف(UCB) یک منبع بسیار ارزشمند از سلول های بنیادی خون ساز برای پیوند است. هدف: بررسی شیوع عفونت سیتومگالوویروسی(CMV) فعال و خاموش در اهدا کننده های خون بند ناف در جمعیت ایرانی
روش ها:
در مجموع 825 نمونه تحت روش های استاندارد جمع آوری شد و برای وجود DNAهای CMV در buffy coat(آلودگی خاموش) و پلاسما(آلودگی فعال) آنالیز شد. از نمونه های Buffy coat و پلاسما به طور جداگانه DNA استخراج شد و با استفاده از Real-Time PCRمورد تست قرار گرفت. همه نمونه های مثبت بوسیله الایزا برای آنتی بادی ضد سیتومگالوویروسی IgG و IgM چک شدند.
نتایج:
آلودگی CMV خاموش در 17 نمونه buffy coat( دو درصد) با سطح پایین بار ویروسی تشخیص داده شد که نشان دهنده حضور آلودگی ویروسی خاموش در اهدا کننده ها است. هیچ کدام از نمونه های پلاسما برای DNAی سیتومگالوویروسی مثبت نبودند که نشان دهنده عدم آلودگی فعال است. در 17 نمونه مثبت، بار ویروسی CMV بین 91 تا 104(میانگین:100) نسخه در میلی لیتر بود. همه نمونه ها که برای DNA ویروسی مثبت بودند برای آنتی بادی IgG سیتومگالوویروسی نیز مثبت بودند و هیچ آنتی بادی IgM سیتومگالوویروسی در نمونه های مثبت مشاهده نشد.
جمع بندی:
سیتومگالوویروس مهم ترین ویروس است که سلول های بنیادی خون ساز را الوده می سازد و می تواند بویژه برای گیرندگان پیوندی که سیستم ایمنی شان مختل شده است خطرناک باشد. بنابراین ما پیشنهاد می کنیم که استفاده از Real-Time PCR برای تشخیص و کمی سازی DNAی ویروسی در buffy coat و پلاسمای خون بند ناف اهدا کنندگان مناسب است. PCR پلاسما برای تشخیص سیتومگالوویروس و سنجش آنتی بادی برای آلودگی سیتومگالوویروسی هیچ حساسیت اضافی را برای تشخیص آلودگی خاموش سیتومگالوویروسی در اهدا کنندگان خون بند ناف ایجاد نمی کنند.
Int J Organ Transplant Med. 2017;8(3):140-145. Epub 2017 Aug 1.
Quantification of Active and Latent Form of Human Cytomegalovirus Infection in Umbilical Cord Blood Donors by Real-Time PCR.
Abedi E1, Kheirandish M1, Sharifi Z2, Samiee S3, Kokhaei P4, Pourpak Z5, Ashraf MJ6.
Abstract
BACKGROUND:
Umbilical cord blood (UCB) is believed to be a highly valuable source of hematopoietic stem cells for transplantation. Objective: To investigate the prevalence of active and latent human cytomegalovirus (CMV) infection in UCB donors in Iranian population.
METHODS:
A total of 825 UCB samples was collected under standard procedures and analyzed for the presence of CMV DNAs in buffy coat (latent infection) and plasma (active infection). DNA was extracted from buffy coat and plasma samples separately and tested with quantitative real-time PCR. All positive samples were checked by ELISA for IgG and IgM anti-CMV antibody.
RESULTS:
Latent CMV infection was detected in 17 (2%) buffy coat samples with a low level of viral load, which indicated the presence of latent viral infection in donors. None of the plasma samples were found positive for CMV DNA reflecting no active infection. In the 17 positive samples, CMV viral load was 91-104 (mean: 100) copies/mL. All samples positive for viral DNA were also found positive for CMV IgG antibody by ELISA. No CMV IgM antibody was detected in positive samples.
CONCLUSION:
CMV is still the most important virus that infects hematopoietic stem cells and could be dangerous, especially for immunocompromized transplant recipients. We therefore suggest using real-time PCR for the detection and quantification of the viral DNA in buffy coat and plasma of UCB donors. PCR of plasma for detection of CMV and antibody assay for CMV infection add no more sensitivity for the detection of latent CMV infection in UCB donors.
PMID: 28924462