مدیفیکاسیون سلول های بنیادی خون بند ناف انسانی با استفاده از پلی اتیلن امین ترکیب شده با پپتید TAT مدیف شده برای تقویت تولید BMP-2
تاریخ انتشار: ﺳﻪشنبه 18 مهر 1396
| امتیاز:
با توجه به نقش نوظهور سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف(hUCB-MSC) برای بازسازی استخوان و انتقال پروتئین های درمانی،نیاز فزاینده ای برای سیستم انتقال ژنی موثر برای مدیفه کردن چنین سلول هایی وجود دارد. توالی های پپتیدی mTAT، aTAT حاوی باقی مانده های هیستیدینی و سیستئینی با موفقیت برای انتقال درون سلولی ژن ها استفاده شده اند. با استفاده از یک پلاسمید gWiz-GFP، ما نشان داده ایم که پلی اتیلن امین ترکیب شده با mTAT(mTAT/PEI) کارایی ترانسفکشن خوبی را در سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف انسانی نشان داده اند. این سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف انسانی ترانسفکت شده با mTAT/PEI برای بیان پروتئین و mRNAی BMP-2 بیان می کنند که نشان دهنده سهولت استفاده از این سلول ها به عنوان سیستم انتقال BMP-2 است. مهم تر این که، در مقایسه با PEI25، یک پلیمر ترانسفکشن غیر ویروسی گلد استاندارد به نام mTAT/PEI سمیت محدودی برای سلول ها دارند. علاوه براین، ما فعالیت استخوان زایی افزایش یافته ای را در آزمایشگاه برای hUCB-MSC بیان کننده BMP-2 نشان می دهند. این نتایج شواهد ترغیب کننده ای را برای استفاده بالقوه mTAT/PEI برای مدیفه کردن ژنتیکی hUCB-MSC به عنوان یک رویکرد برای تقویت بازسازی بافتی نشان می دهند.
Biomed Res Int. 2017;2017:2971413. doi: 10.1155/2017/2971413. Epub 2017 Aug 17.
Modification of Human Umbilical Cord Blood Stem Cells Using Polyethylenimine Combined with Modified TAT Peptide to Enhance BMP-2 Production.
Wang Y1, You C1, Wei R1, Zu J1, Song C1, Li J2, Yan J1.
Abstract
With the emerging role of umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells (hUCB-MSC) for bone regeneration and delivery of therapeutic proteins, there is an increasing need for effective gene delivery systems to modify such cells. mTAT, a TAT peptide sequence bearing histidine and cysteine residues, has been successfully used for intracellular gene delivery. Using a gWiz-GFP plasmid, we demonstrated that polyethylenimine combined with mTAT (mTAT/PEI) displayed good transfection efficacy in hUCB-MSC. hUCB-MSC transfected with mTAT/PEI were shown to express more BMP-2 protein and mRNA, indicating the feasibility of using the cells as a BMP-2 delivery system. Importantly, compared to PEI25, a "gold standard" nonviral transfection polymer, mTAT/PEI had limited toxicity to the cells. Furthermore, we demonstrated enhanced osteogenic activity in vitro for BMP-2 expressing hUCB-MSC. These results provide encouraging evidence for the potential use of mTAT/PEI to genetically modify hUCB-MSC as an approach to enhance tissue regeneration.
PMID: 28951869