بهینه سازی تکثیر سلول های بنیادی پرتوان القایی انسانی در کشت سوسپانسیون هم زنی
تاریخ انتشار: شنبه 22 مهر 1396
| امتیاز:
سلول های بنیادی پرتوان القایی انسانی(hiPSCs) به دلیل ظرفیت ذاتی شان در خود نوزایی و تمایز به سلول های سه لایه زایای جنینی امیدواری های زیادی را برای کاربرد در طب بازساختی ایجاد کره اند. برای کاربردهای بالینی، مقادیر زیاد hiPSCهای تولید شده در فرایندهای کشت استاندارد سازی شده و مقیاس پذیر مورد نیاز است. چندین گروه از جمله ما، روش هایی را برای تولید زیاد hiPSCها در بیورآکتورهای هم زن و در محیط کشت مشخص از نظر شیمیایی ارائه کرده ایم. در این جا، ما مراحل و فاکتورهای حیاتی که تکثیر و محصول نهایی hiPSCها را در کشت های سوسپانسیون هم زن تحت تاثیر قرار می دهند، بهینه سازی کردیم که شامل شرایط تلقیح، تراکم کشت، اندازه تجمعات، میزان هم زدن و روش های پاساژ دادن سلولی بود. بعد از چندین پاساژ در بیورآکتورهای سوسپانسیون هم زن، hiPSCها پرتوان باقی مانده و کاردیوتیپ طبیعی داشتند و قادر به تمایز به هر سه لایه زایا بودند.
Stem Cells Dev. 2017 Oct 10. doi: 10.1089/scd.2017.0090. [Epub ahead of print]
Optimizing Human Induced Pluripotent Stem Cell Expansion in Stirred Suspension Culture.
Meng G, Liu S, Poon A, Rancourt DE1.
Abstract
Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) hold great hopes for application in regenerative medicine due to their inherent capacity to self-renew and differentiate into cells from the three embryonic germ layers. For clinical applications, a large quantity of hiPSCs produced in standardized and scalable culture processes is required. Several groups including ours have developed methodologies for scaled-up hiPSC production in stirred bioreactors in chemically defined medium. Here, we optimized the critical steps and factors that affect hiPSC expansion and yield in stirred suspension cultures including inoculation conditions, seeding density, aggregate size, agitation rate, and cell passaging method. After multiple passages in stirred suspension bioreactors, hiPSCs remained pluripotent, karyotypically normal, and capable of differentiating into all three germ layers.
PMID: 29017378