اثر miR-21 در پیشبرد تمایز رگزایی سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف در آزمایشگاه

تاریخ انتشار: شنبه 07 بهمن 1396 | امتیاز: Article Rating

هدف:

بررسی اثر miR-21 روی پیشبرد تمایز عروقی سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف(UCBMSCs) در آزمایشگاه

روش ها:

سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف(از بانک سلول های بنیادی دانشگاه Tongji) کشت شدند؛ وکتور لنتی ویروسی Lenti-LacZ-Luciferase و Lenti-miR-21-Luciferase ساخته شدند، real-time PCR و وسترن بلات به منظور تشخیص بیان فاکتورهای کلیدی رگزایی در روز های 0، 1، 4، 7 و 14 بعد  از این که ژن هدف به درون سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف ترانسداکت شدند انجام گرفت؛ نسل سوم این سلول با Lenti-LacZ-Luciferase و Lenti-miR-21-Luciferase ترانسداکت شدند؛ سنجش مجرای ماتری ژل برای مشاهده ساختار شبه لوله زیر میکروسکوپ صورت گرفت. داده ها با استفاده از Student’s t test و آنالیز واریانس با نرم افزار SPSS13 از نظر آماری آنالیز شدند.

نتایج:

 سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف با موفقیت کشت شدند؛ نتایج qPCR و وسترن بلات نشان داد بیان HIF-1α و VEGF در گروه miR-21 در روز چهارم به طور معناداری افزایش یافت و تا روز هفت و 14 افزایش یافت. نتایج ماتری ژل نشان داد که ساختارهای لوله ای در گروه Lenti-miR-21-Luciferase در مقایسه با سایر گروه ها از نظر مقدار و طول بیشتر بودند.

جمع بندی:

میکروRNAی 21 یا miR-21 می تواند تمایز عروقی سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف را افزایش دهد.

Shanghai Kou Qiang Yi Xue. 2017 Oct;26(5):471-475.

[Effect of miR-21 in promoting angiogenesis differentiation of umbilical cord blood mesenchymal stem cells in vitro].

[Article in Chinese]

Tian ZK1, Liu L, Chen DL, Wang P, Zhang JM, Tang Y, Tang CB.

Abstract

PURPOSE:

To investigate the effect of miR-21 on promoting vascular differentiation of umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells (UCBMSCs) in vitro.

METHODS:

UCBMSCs (from Stem Cell Bank of Tongji University) were cultured; Lenti-LacZ-Luciferase and Lenti-miR-21-Luciferase Lentiviral vector were reconstructed; Real-time fluorescence quantification PCR and Western blot were performed to detect the expression of key angiogenic factors at 0, 1, 4, 7 and 14 d after target gene was transduced into UCBMSCs; UCBMSCs of the third generation were transduced with Lenti-LacZ-Luciferase and Lenti-miR-21- Luciferase; matrigel tube assay was performed to observe the tube-like structure under microscope. The data were statistically analyzed using Student's t test and variance analysis with SPSS13.0 software package.

RESULTS:

UCBMSCs were successfully cultured; The results of qPCR and Western blot showed the expression of HIF-1α and VEGF in miR-21 group significantly increased at 4 d and continued until 7 d and 14 d; Matrigel results showed the tubular structures in Lenti-miR-21-Luciferase group were more than other groups both in amount and in length.

CONCLUSIONS:

MiR-21 can promote vascular differentiation of UCBMSCs.

PMID: 29308505
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان