اثر miR-21 در پیشبرد تمایز رگزایی سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف در آزمایشگاه
تاریخ انتشار: شنبه 07 بهمن 1396
| امتیاز:
هدف:
بررسی اثر miR-21 روی پیشبرد تمایز عروقی سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف(UCBMSCs) در آزمایشگاه
روش ها:
سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف(از بانک سلول های بنیادی دانشگاه Tongji) کشت شدند؛ وکتور لنتی ویروسی Lenti-LacZ-Luciferase و Lenti-miR-21-Luciferase ساخته شدند، real-time PCR و وسترن بلات به منظور تشخیص بیان فاکتورهای کلیدی رگزایی در روز های 0، 1، 4، 7 و 14 بعد از این که ژن هدف به درون سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف ترانسداکت شدند انجام گرفت؛ نسل سوم این سلول با Lenti-LacZ-Luciferase و Lenti-miR-21-Luciferase ترانسداکت شدند؛ سنجش مجرای ماتری ژل برای مشاهده ساختار شبه لوله زیر میکروسکوپ صورت گرفت. داده ها با استفاده از Student’s t test و آنالیز واریانس با نرم افزار SPSS13 از نظر آماری آنالیز شدند.
نتایج:
سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف با موفقیت کشت شدند؛ نتایج qPCR و وسترن بلات نشان داد بیان HIF-1α و VEGF در گروه miR-21 در روز چهارم به طور معناداری افزایش یافت و تا روز هفت و 14 افزایش یافت. نتایج ماتری ژل نشان داد که ساختارهای لوله ای در گروه Lenti-miR-21-Luciferase در مقایسه با سایر گروه ها از نظر مقدار و طول بیشتر بودند.
جمع بندی:
میکروRNAی 21 یا miR-21 می تواند تمایز عروقی سلول های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف را افزایش دهد.
Shanghai Kou Qiang Yi Xue. 2017 Oct;26(5):471-475.
[Effect of miR-21 in promoting angiogenesis differentiation of umbilical cord blood mesenchymal stem cells in vitro].
[Article in Chinese]
Tian ZK1, Liu L, Chen DL, Wang P, Zhang JM, Tang Y, Tang CB.
Abstract
PURPOSE:
To investigate the effect of miR-21 on promoting vascular differentiation of umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells (UCBMSCs) in vitro.
METHODS:
UCBMSCs (from Stem Cell Bank of Tongji University) were cultured; Lenti-LacZ-Luciferase and Lenti-miR-21-Luciferase Lentiviral vector were reconstructed; Real-time fluorescence quantification PCR and Western blot were performed to detect the expression of key angiogenic factors at 0, 1, 4, 7 and 14 d after target gene was transduced into UCBMSCs; UCBMSCs of the third generation were transduced with Lenti-LacZ-Luciferase and Lenti-miR-21- Luciferase; matrigel tube assay was performed to observe the tube-like structure under microscope. The data were statistically analyzed using Student's t test and variance analysis with SPSS13.0 software package.
RESULTS:
UCBMSCs were successfully cultured; The results of qPCR and Western blot showed the expression of HIF-1α and VEGF in miR-21 group significantly increased at 4 d and continued until 7 d and 14 d; Matrigel results showed the tubular structures in Lenti-miR-21-Luciferase group were more than other groups both in amount and in length.
CONCLUSIONS:
MiR-21 can promote vascular differentiation of UCBMSCs.
PMID: 29308505