پروتکلی ساده برای ترانسفکت سلول های بنیادی مزانشیمی انسانی
تاریخ انتشار: شنبه 14 بهمن 1396
| امتیاز:
اهداف و نتایج:
سلول های استرومایی مزانشیمی(MSCs) اهداف بالقوه ای برای رویکردهای مبتنی بر سلول درمانی و ژن درمانی علیه انواع مختلف بیماری ها هستند. سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان، به دلیل این که قادر به تمایز به رده های مختلف هستند و قابلیت تکثیری قابل توجهی دارند، جمعیت هدف امیدوار کننده ای محسوب می شوند. این ویژگی ها آن ها را کاندیدای قوی برای انتقال ژن ها و احیای عملکرد اندام ها می سازد. با این حال، همانند سایر سلول های اولیه، سلول های بنیادی مزانشیمی ترانسفکت مشکلی دارند. به منظور استاندارد سازی یک پروتکل ساده برای ترانسفکت سلول های بنیادی مزانشیمی، ما مجموعه ای از آزمایش ها را انجام دادیم و پروتکلی را بدست آوردیم که نیازمند استفاده از ذرات ویروسی یا سایر تجهیزات گران قیمت اختصاصی نیست.
جمع بندی:
ترانسفکت سلول های بنیادی مزانشیمی در پاساژهای اولیه با نسبت لیپید/DNAی3.0 µL/µg با لیپوفکتامین 3000® کارایی ترانسفکشن خوبی را برای سلول های بنیادی مزانشیمی انسانی(up to 26%) ایجاد کرد که سریع، ساده و بی خطر است.
Biotechnol Lett. 2018 Jan 17. doi: 10.1007/s10529-018-2505-8. [Epub ahead of print]
A simple protocol for transfecting human mesenchymal stem cells.
de Carvalho TG1,2, Pellenz FM1, Laureano A3, da Rocha Silla LM3, Giugliani R1,2, Baldo G4,5, Matte U1,2.
Abstract
OBJECTIVES AND RESULTS:
Mesenchymal stromal cells (MSCs) are potential targets for cell and gene therapy-based approaches against a variety of different diseases. The MSCs from bone marrow are a promising target population as they are capable of differentiating along multiple lineages and have significant expansion capability. These characteristics make them strong candidates for delivering genes and restoring organ systems function. However, as other primary cells, MSCs are difficult to transfect. In order to standardize a simple protocol for transfection of MSCs, we conducted a series of experiments and achieved a protocol that does not require the use of viral particles or specific expensive equipment.
CONCLUSION:
MSCs transfection at early passages using a ratio lipid/DNA of 3.0 µL/µg with Lipofectamine 3000® yields good transfection efficiencies for human MSCs (up to 26%) and is rapid, simple, and safe.
PMID: 29344849