آنالیز کمی سلامت بافت بند ناف کمپوزیت با استفاده از رویکرد اکسپلنت استاندارد شده و یک سنجش فعالیت متابولیکی
تاریخ انتشار: جمعه 04 اسفند 1396
| امتیاز:
پیشینه:
بافت بند ناف(UC) می تواند در رویکردی غیر تهاجمی جمع آوری شود و سلول های پیش ساز آن با ارزش درمانی بالقوه جداسازی و ذخیره شوند. سلول های استرومایی مزانشیمی(MSCs) می توانند به طور مناسبی با استفاده از فرا رشد اکسپلنتی و بدون این که اثر واضحی روی عملکرد آن ها وجود داشته باشد از بافت بند ناف تازه یا فریز شده بدست آیند. شماری از بانک های سلول های بنیادی حفاظت انجمادی بند ناف (همراه با خون بند ناف) را برای کاربردهای سلول درمانی در آینده پیشنهاد می کنند . در این مجموغه، اندازه گیری و مونیتور کردن کیفیت بند ناف حیاتی است.
مواد و روش ها:
اکسپلنت های بند ناف با استفاده از یک سیستم کشت و نمره دهی مورد استفاده برای چسبندگی و تکثیر سلولی ارزیابی شدند. نمره اکسپلنت برای بافت های تازه و فریز شده و سپس ذوب شده مشتق از یک بند ناف مشابه مقایسه شد. فعالیت متابولیکی بافت بند ناف کمپوزیت نیز بعد از قرار گرفتن در معرض شرایطی که پیش بینی می شود روی کیفیت بند ناف اثر بگذارد سنجیده شده و با نمره اکسپلنت درون بند ناف مشابه، مقایسه شد.
نتایج:
همه بافت های تازه و فریز شده سلول های شبه بنیادی مزانشیمی را دارا بودند و حفاظت انجمادی بافت، توانایی جداسازی سلول های بنیادی مزانشیمی بوسیله روش اکسپلنت را ممانعت نکرد. نمره بافت بند ناف ذوب شده 91 درصد(±0.6%; P = 0.0009) نمونه تازه از بافت مشابه بیولوژیک بود. درون همان بند ناف، نمره اکسپلنت با هر دو محصول سلولی(R2 = 0.85) و فعالیت متابولیک بافتی(R2 = 0.69) مرتبط بود.
بحث:
سنجش نمره دهی یکدست اکسپلنت می تواند اطلاعاتی را در مورد کیفیت بافت بند ناف کمپوزیت ارائه دهد. چنین ارزیابی کمی برای آنالیز تنوع پذیری بافتی و مونیتور کردن فرایند مفید است. علاوه براین، سنجش سلامت متابولیکی بافت بند ناف نتایجی را ارائه کرد که به نتایج نمره دهی اکسپلنت به خوبی مطابقت داشت.
Cytotherapy. 2018 Feb 8. pii: S1465-3249(18)30006-9. doi: 10.1016/j.jcyt.2018.01.001. [Epub ahead of print]
Quantitative analysis of composite umbilical cord tissue health using a standardized explant approach and an assay of metabolic activity.
Skiles ML1, Brown KS2, Tatz W3, Swingle K4, Brown HL2.
Abstract
BACKGROUND:
Umbilical cord (UC) tissue can be collected in a noninvasive procedure and is enriched in progenitor cells with potential therapeutic value. Mesenchymal stromal cells (MSCs) can be reliably harvested from fresh or cryopreserved UC tissue by explant outgrowth with no apparent impact on functionality. A number of stem cell banks offer cryopreservation of UC tissue, alongside cord blood, for future cell-based applications. In this setting, measuring and monitoring UC quality is critical.
MATERIALS AND METHODS:
UC explants were evaluated using a plating and scoring system accounting for cell attachment and proliferation. Explant scores for fresh and cryopreserved-then-thawed tissue from the same UC were compared. Metabolic activity of composite UC tissue was also assayed after exposure of the tissue to conditions anticipated to affect UC quality and compared with explant scores within the same UC.
RESULTS:
All fresh and cryopreserved tissues yielded MSC-like cells, and cryopreservation of the tissue did not prevent the ability to isolate MSCs by the explant method. Thawed UC tissue scores were 91% (±0.6%; P = 0.0009) that of the fresh, biologically identical tissue. Within the same UC, explant scores correlated well to both cell yield (R2 = 0.85) and tissue metabolic activity (R2 = 0.69).
DISCUSSION:
A uniform explant scoring assay can provide information about the quality of composite UC tissue. Such quantitative measurement is useful for analysis of tissue variability and process monitoring. Additionally, a metabolic assay of UC tissue health provides results that correlate well to explant scoring results.
Copyright © 2018 International Society for Cellular Therapy. Published by Elsevier Inc. All rights reserved.
PMID: 29429941