پروستاگلاندین F-2α ترشح فاکتور رشد اندوتلیالی عرقی را تحریک می کند و تکثیر سلولی و مهاجرت سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی را القا می کند

تاریخ انتشار: جمعه 14 اردیبهشت 1397 | امتیاز: Article Rating

اهداف:

 امروزه مهندسی بافت فاکتورهایی را استفاده می کند که می  توانند تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی(MSCs) به سایر انواع سلول ها را القا کنند. با این حال، مشکل رگزایی در این بافت های تمایز یافت، زمینه ای حل نشده در تحقیقات است. هدف این مطالعه بررسی اثر پروستاگلاندین F-2α یا PGF-2α روی بیان فاکتور رشد اندو تلیالی عروقی(VEGF) در سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی انسانی بوده است.

مواد و روش ها:

در این تحقیق آزمایشگاهی، بافت چربی انسانی با استفاده از کلاژناز هضم شد. سلول های بنیادی مزانشیمی جداسازی شده با پروستاگلاندین F-2α( تا 5 میکروگرم/میلی لیتر) تیمار شده و برای 96 ساعت انکوبه شدند. تکثیر سلولی، ترشح VEGF و مهاجرت سلولی به صورت مستقل بوسیله روش های MTT، BrdU، الایزا، RT-PCR و خراشیدن بستر سنجیده شد.

نتایج:

رشد سلولی در غلظت های 1، 5/2 و 5 میکروگرم/میلی لیتر پروستاگلاندین F-2α در مقایسه با سلول های کنترل به طور قابل توجه کاهش نیافت که نشان می دهد این غلظت های پروستاگلاندین F-2α برای رشد سلولی سمی نیست. نتایج سنجش BrdU نشان داد که در مقایسه با سلول های تیمار نشده، میزان وارد شدن  یا تلفیق BrdU در بین سلول های تیمار شده با غلظت های 1/0، 1، 5/2 و 5 میکروگرم/میلی لیتر پروستاگلاندین F-2α به ترتیب 08/1، 96/1، 2 و 8/1  برابر بود. تست خراش بستر نیز نشان دهنده اثر مثبت روی تکثیر و مهاجرت سلولی بود. سلول های تیمار شده با غلظت 1 میکروگرم/میلی لیتر پروستاگلاندین F-2α برای 12 ساعت، بیشترین مهاجرت و گستردگی نسبی را در مقایسه با سلول های تیمار نشده نشان دادند. الایزای کمی VEGF و نتایج RT-PCR افزایش در بیان و ترشح VEGF را در حضور پروستاگلاندین F-2α نشان داد. میزان VEGF تولید شده در پاسخ به غلظت های1/0، 1، 5/2 و 5 میکروگرم/میلی لیتر پروستاگلاندین F-2α به ترتیب 62.4 ± 3.2،66.3 ± 3.7،53.1 ± 2.6 و 49.0 ± 2.3 پیکوگرم در میلی لیتر در مقایسه با غلظت 35.2 ± 2.1 پیکوگرم بر میلی لیتر سلول های تیمار نشده بود.

جمع بندی:

تحریک ترشح VEGF بوسیله سلول های بنیادی مزانشیمی تیمار شده با پروستاگلاندین F-2α  می تواند برای القای رگزایی در مهندسی بافت در آزمایشگاه مفید باشد.

Cell J. 2018 Jul;20(2):259-266. doi: 10.22074/cellj.2018.5026. Epub 2018 Mar 18.

Prostaglandin F-2α Stimulates The Secretion of Vascular Endothelial Growth Factor and Induces Cell Proliferation and Migration of Adipose Tissue Derived Mesenchymal Stem Cells.

Deezagi A1, Shomali S2.

Abstract

OBJECTIVES:

Tissue engineering today uses factors that can induce differentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) into other cell types. However, the problem of angiogenesis in this differentiated tissue remains an unresolved area of research interest. The aim of this study was to investigate the effects of prostaglandin F-2α (PGF-2α) on the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in human adipose tissue derived MSCs.

MATERIALS AND METHODS:

In this experimental research, human adipose tissue was digested using collagenase. The isolated MSCs cells were treated with PGF-2α (up to 5 μg/ml) and incubated for 96 hours. Cell proliferation, secretion of VEGF and cell migration were spontaneously assayed by MTT, BrdU, ELISA, RT-PCR and scratching methods.

RESULTS:

Cell growth at 1.0, 2.5, 5 μg/ml of PGF-2α was not significantly reduced compared to control cells, suggesting that these concentrations of PGF-2α are not toxic to cell growth. The results of the BrdU incorporation assay indicated that, in comparison to untreated cells, BrdU incorporation was respectively 1.08, 1.96, 2.0 and 1.8 fold among cells treated with 0.1, 1.0, 2.5 and 5.0 μg/ml of PGF-2α. The scratching test also demonstrated a positive influence on cell proliferation and migration. Cells treated with 1.0 μg/ml of PGF-2α for 12 hours showed the highest relative migration and coverage in comparison to untreated cells. Quantitative VEGF ELISA and RTPCR results indicated an increase in VEGF expression and secretion in the presence of PGF-2α. The amount of VEGF produced in response to 0.1, 1.0, 2.5 and 5.0 μg/ml of PGF-2α was 62.4 ± 3.2 , 66.3 ± 3.7, 53.1 ± 2.6 and 49.0 ± 2.3 pg/ml, respectively, compared to the 35.2 ± 2.1 pg/ml produced by untreated cells.

CONCLUSIONS:

Stimulation of VEGF secretion by PGF-2α treated MSCs could be useful for the induction of angiogenesis in tissue engineering in vitro.

Copyright© by Royan Institute. All rights reserved.

PMID: 29633604
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان