اثر هم کشتی با سلول های اپی تلیالی آمنیوتیک روی مشخصه های زیستی سلول های بنیادی مزانشیمی آمنیوتیک
تاریخ انتشار: دوشنبه 14 خرداد 1397
| امتیاز:
هدف مطالعه حاضر بررسی اثر هم کشتی سلول های اپی تلیالی آمنیوتیک(AECs) روی مشخصه های زیستی سلول های بنیادی مزانشیمی آمنیوتیک(AMSCs) و برای مقایسه بیان CXCR4 در AMSCهای هم کشت شده و بررسی نقش محور SDF1/CXCR4 در خانه گزینی و مهاجرت AMSCها بود. سلول های بنیادی مزانشیمی آمنیوتیک از پرده آمنیوتیک انسانی جداسازی و خالص سازی شده و در شرایط آزمایشگاهی به استئوبلاست و آدیپوسیت تمایز داده شد که بوسیله رنگ آمیز von Kossa و Oil Red O مشخص شد. زنده مانی سلول ها در ساعت های 24، 48 و 72 بوسیله شمارش سلولی با kit-8 و سنجش تریپان بلو اندازه گیری شد و بیان CXCR4 بوسیله فلوسایتومتری مبتنی بر ایمنوفلورسنس و qRT-PCR ارزیابی شد و توانایی مهاجرتی AMSCها در شرایط آزمایشگاهی بوسیله سنجش مهاجرت ارزیابی شد. نتایج نشان داد که زنده مانی سلول ها(در 48 و 72 ساعت) و بقا(در 24، 48 و 72 ساعت) در گروه های هم کشتی و سروم در مقایسه با گروه بدون سروم بالاتر بود. علاوه براین، بیان mRNA و پروتئین CXCR4 و مهاجرت در امتداد شیب SDF1 در گروه هم کشتی و گروه بدون سروم در مقایسه با گروه سروم بلاتر بود. به طور کلی، نتایج نشان داد که AMSCهای هم کشت شده با AECها فعالیت تکثیری و نرخ بقای تقویت شده ای را نشان می دهند. در مجموع، مطالعه حاضر نشان داد که هم کشتی AMSCها با AECها، CXCR4 را روی سطج AMSCها افزایش می دهد و توانایی مهاجرتی AMSCها را در شرایط آزمایشگاهی تقویت می کند. این نتایج ممکن است مهاجرت جهت دار و توانایی خانه گزینی AMSCها را بهبود ببخشد و هم چنین یک مبنای درمانی را برای کاربرد AMSCها در بالین به عنوان یک استراتژی جدید برای افزایش موفقیت پیوند سلول های بنیادی خون ساز، ارائه دهد.
Mol Med Rep. 2018 May 23. doi: 10.3892/mmr.2018.9053. [Epub ahead of print]
Effect of co‑culture with amniotic epithelial cells on the biological characteristics of amniotic mesenchymal stem cells.
Ran LJ1, Zeng Y1, Wang SC2, Zhang DS1, Hong M3, Li SY3, Dong J3, Shi MX1.
Abstract
The aim of the present study was to investigate the effect of co‑culture with amniotic epithelial cells (AECs) on the biological characteristics of amniotic mesenchymal stem cells (AMSCs), to compare the expression of C‑X‑C motif chemokine receptor 4 (CXCR4) in co‑cultured AMSCs and to investigate the roles of the stromal cell‑derived factor‑1 (SDF‑1)/CXCR4 axis in the homing and migration of AMSCs. AMSCs were isolated from human amniotic membranes, purified and then differentiated into osteoblasts and adipocytes in vitro, which was verified by von Kossa Staining and Oil Red O staining. Cell viability was measured by Cell Counting kit‑8 and trypan blue assays at 24, 48 and 72 h, the expression of CXCR4 was analyzed by immunofluorescence‑based flow cytometry and reverse transcription‑quantitative polymerase chain reaction, and the migration ability of AMSCs in vitro was observed by a migration assay. The results demonstrated that cell viability (at 48 and 72 h) and survival (at 24, 48 and 72 h) in the co‑culture and serum groups were higher compared with the serum‑free group. Furthermore, CXCR4 mRNA and protein expression, and migration along the SDF‑1 gradient, in the co‑culture and serum‑free groups were higher compared with the serum group. Overall, the results indicated that AMSCs co‑cultured with AECs exhibited enhanced proliferation activity and survival rate. In conclusion, the present study demonstrated that co‑culture of AMSCs with AECs upregulated CXCR4 on the surface of AMSCs and enhanced the migration ability of AMSCs in vitro. This result may improve the directional migration and homing ability of AMSCs, as well as provide a theoretical basis for the application of AMSCs in clinical practice as a novel strategy to increase the success of hematopoietic stem cell transplantation.
PMID: 29845205