یک مدل خوکی جدید برای مطالعات آینده گرافت های چربی غنی از سلول
تاریخ انتشار: جمعه 15 تیر 1397
| امتیاز:
پیشینه:
گرافت های چربی غنی از سلول نتایج امیدوار کننده ای را برای بهبود بقای گرافت نشان داده اند، هر چند سوالات بی پاسخ زیادی باقی مانده است. مدل جانوری بزرگ برای پر کردن فاصله بین مطالعات جوندگان و کارآزمایی های انسانی نیاز است. ما یک رویکرد مرحله به مرحله را در استفاده خوکچه های گوتینگن به عنوان مدلی برای مطالعات انسانی گرافت چربی با حجم زیاد و غنی از سلول ارائه کرده ایم.
روش ها:
پیوند چربی به صورت تزریقات بولوس و گرافت چربی ساختاری صورت گرفت. احتباس گرافت بوسیله تصویربرداری روزنانس مغناطیسی بعد از 120 روز مورد ارزیابی قرار گرفت. کسر عروقی استرومایی(SVF) از چربی برش خورده و چربی لیپوساکشن شده از جایگاه های آناتومیکی مختلف جداسازی شد و آنالیز شد. سلول های بنیادی /استرومایی مشتق از چربی خوکی(ASCs) در حضور مکمل های رشد مختلف کشت شدند و زمان دو برابر شدن جمعیت، بیشینه محصول تولیدی، بیان مارکرهای سطحی و پتانسیل تمایز بررسی شد.
نتایج:
گرافت چربی ساختاری در گرافت های بولوس سینه ای و زیر جلدی در ناحیه شکم نشان داد که میانگین احتباس گرافت برای آن ها به ترتیب55/53 درصد و 28/15 درصد است که مشابه با گزارش های انسانی است. لیپوساکشن در مقایسه با برش های چربی سلول های SVF کمتری تولید کرد و چربی شکمی بیشترین میزان سلول های SVF به ازای هر گرم را داشت که مشابه با انسان بود. علاوه براین، ما نشان دادیم که سلول های بنیادی چربی خوک می توانند به راحتی جداسازی شده و در محیط کشت و در حضور عصاره پلاکتی خوکی و سروم جنینی گاوی کشت شوند که استفاده از ده درصد عصاره پلاکت خوکی و 20 درصد سروم جنین گاومی منجر به ایجاد زمان دو برابر شدن جمعیت، بیشینه محصول سلولی، پروفایل مارکر سطحی و تمایز رده ای قابل مقایسه با انسان شد.
جمع بندی:
خوکچه های گوتینگن یک مدل جانوری بزرگ، مقرون به صرفه و در دسترس برای مطالعات کاربردی آینده گرافت چربی غنی از سلول هستند.
Plast Reconstr Surg Glob Open. 2018 Apr 4;6(4):e1735. doi: 10.1097/GOX.0000000000001735. eCollection 2018 Apr.
A Novel Porcine Model for Future Studies of Cell-enriched Fat Grafting.
Rasmussen BS1, Sørensen CL1, Vester-Glowinski PV1, Herly M1, Kurbegovic S2, Ørholt M1, Svalgaard JD3, Kølle ST1, Kristensen AT4, Talman MM5, Drzewiecki KT1, Fischer-Nielsen A3.
Abstract
Background:
Cell-enriched fat grafting has shown promising results for improving graft survival, although many questions remain unanswered. A large animal model is crucial for bridging the gap between rodent studies and human trials. We present a step-by-step approach in using the Göttingen minipig as a model for future studies of cell-enriched large volume fat grafting.
Methods:
Fat grafting was performed as bolus injections and structural fat grafting. Graft retention was assessed by magnetic resonance imaging after 120 days. The stromal vascular fraction (SVF) was isolated from excised fat and liposuctioned fat from different anatomical sites and analyzed. Porcine adipose-derived stem/stromal cells (ASCs) were cultured in different growth supplements, and population doubling time, maximum cell yield, expression of surface markers, and differentiation potential were investigated.
Results:
Structural fat grafting in the breast and subcutaneous bolus grafting in the abdomen revealed average graft retention of 53.55% and 15.28%, respectively, which are similar to human reports. Liposuction yielded fewer SVF cells than fat excision, and abdominal fat had the most SVF cells/g fat with SVF yields similar to humans. Additionally, we demonstrated that porcine ASCs can be readily isolated and expanded in culture in allogeneic porcine platelet lysate and fetal bovine serum and that the use of 10% porcine platelet lysate or 20% fetal bovine serum resulted in population doubling time, maximum cell yield, surface marker profile, and trilineage differentiation that were comparable with humans.
Conclusions:
The Göttingen minipig is a feasible and cost-effective, large animal model for future translational studies of cell-enriched fat grafting.
PMID: 29876178