تولید سلول های بنیادی پرتوان القایی مشتق از بیماران مبتلا به بیماری بطن راست آریتموژنیک
تاریخ انتشار: یکشنبه 24 تیر 1397
| امتیاز:
هدف:
تولید سلول های بنیادی پرتوان القایی(iPSCs) از بیماران مبتلا به کاردیومیوپاتی بطن راست آریتموژنیک(ARVC)
روش ها:
فیبروبلاست ها از بیماران مبتلا به ARVC جداسازی شد و جایگاه های موتاسیون DNA شناسایی شد. ما فیبروبلاست های بیماران را بوسیله ترانسداکشن ویروس سندایی با فاکتورهای پرتوانی تعریف شده بازبرنامه ریزی کردیم. سپس، ما پرتوانی ARVC-iPSCs را بوسیله آنالیزهای ایمنوفلورسنس، real-time PCR و سنجش تشکیل سه لایه زایا ارزیابی کردیم. هم چنین ما ARVC-iPSCها را با تنظیم مسیر پیام رسانی Wnt به سمت رده قلبی تمایز دادیم.
نتایج:
علاوه برای رنگ آمیزی مثبت برای آلکالین فسفاتاز، iPSCهای مشتق از بیماران ARVC ژن های مربوط به پرتوانی و مارکر سلول های بنیادی جنینی OCT4، SSEA4 و TRA-1-81 را نیز بیان کردند. تشکیل اجسام جنینی در شرایط آزمایشگاه و تست تشکیل تراتوما در شرایط درون تنی نشان داد که ARVC-iPSCها می توانند به هر سه لایه زا تمایز یابند. بعد از تمایز قلبی آزمایشگاهی، ARVC-iPSCها می توانند با موفقیت به توده ای با ضربان خود بخودی القا شوند که رنگ آمیزی cTNT آن ها مثبت بود.
جمع بندی:
سلول های بنیادی پرتوان القایی با الحاق ویروس سندایی با موفقیت از فیبروبلاست درمی بیماران مبتلا به ARVC تولید شدند. این سلول ها می توانند مدل آزمایشگاهی ارزشمندی را برای مطالعه مکانیسم های مولکولی ARVC ارائه کنند.
Zhongguo Ying Yong Sheng Li Xue Za Zhi. 2017 Jun 8;33(6):503-507. doi: 10.12047/j.cjap.5601.2017.120.
[Generation of induced pluripotent stem cells from arrhythmogenic right ventricular disease patient].
[Article in Chinese]
Jiang B1, Wang GQ1, Li HX1, Jiang WP1, Chen T1, Jiang Y1.
Abstract
OBJECTIVE:
To establish the induced pluripotent stem cells (iPSCs) from patients with arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy (ARVC).
METHODS:
The fibroblasts were isolated from ARVC patient and DNA mutation sites were confirmed. We reprogrammed the patient fibroblasts to pluripotency by sendaiviral transduction with defined pluripotency factors. Then, we evaluated the pluripotency of ARVC-iPSCs by performing the immunofluorescence analysis, real-time PCR and 3 germ layer formation assay. We also induced the ARVC-iPSCs into cardiac specific differentiation by regulating Wnt signaling pathway.
RESULTS:
Apart from alkaline phosphatase positive staining, iPSCs derived from ARVC patients expressed pluripotent related genes and embryonic stem cell marker OCT4, SSEA4 and TRA-1-81. Embryonic body formation in vitro and teratoma test in vivo demonstrated that ARVC-iPSCs could differentiate into all three germ layers. After in vitro cardiac differentiation, ARVC-iPSC could be successfully induced to spontaneously beating mass with cTNT staining positive.
CONCLUSIONS:
Induced pluripotent stem cell was successfully established by integration free sendai virus from dermal fibroblast of patients with ARVC. It would provide the valuable experimental model to study the molecular mechanism of ARVC.
PMID: 29931898