تولید سلول های بنیادی پرتوان القایی در ماکائوهای ژاپنی(Macaca fuscata)
تاریخ انتشار: پنجشنبه 15 شهریور 1397
| امتیاز:
پریمات های غیر انسانی نزدیک ترین قرابت را به ما دارند و به همین دلیل مورد توجه ویژه پژوهش های اکولوژیک، تکاملی و زیست پزشکی قرار گرفته اند. ماکائوهای ژاپنی(Macaca fuscata) در پیشرفت پریمات شناسی و علوم عصبی طی 60 سال گذشته مشارکت داشته اند. برخلاف این اهمیت، پایه مولکولی و سلولی ماکائوهای ژاپنی به دلیل فقدان ابزارهای سلولی مفید ناشناخته باقی مانده است. در این جا ما سلول های بنیادی پرتوان القایی(iPSCs) را از فیبروبلاست های پوستی ماکائوهای ژاپنی و با استفاده از ویروس سندای و وکتورهای پلازمید تولید کردیم. سلول های iPS ماکائوهای ژاپنی(jm-iPSCs) تحت شرایط کشت بدون فیدر تثبیت شدند اما سلول های فیدر برای حفظ آن ها ضروری هستند. سلول های jm-iPSCs، کلونی های مسطح شبه iPSCهای انسانی را شکل دادند که برای آنتی ژن های پرتوانی مانند آلکالین فسفاتاز، SSEA4 و TRA-1-81 مثبت بودند. هم چنین آن ها OCT3/4، SOX2، L-MYC و KLF4و سایر ژن های مارکر پرتوانی را بیان کردند. پتانسیل تمایز به هر سه رده زایا و سلول های بنیادی عصبی بوسیله تشکیل اجسام جنینی و نوروسفیرها اثبات شد. سلول های jm-iPSC یک ابزار آزمایشگاه قوی را برای بررسی مکانیسم های دخیل در مطالعات تکوینی و فیزیولوژی با ماکائوهای ژاپنی ارائه می دهند.
Sci Rep. 2018 Aug 15;8(1):12187. doi: 10.1038/s41598-018-30734-w.
Derivation of induced pluripotent stem cells in Japanese macaque (Macaca fuscata).
Nakai R1, Ohnuki M2,3, Kuroki K1, Ito H1, Hirai H1, Kitajima R1, Fujimoto T4, Nakagawa M2, Enard W3, Imamura M5.
Abstract
Non-human primates are our closest relatives and are of special interest for ecological, evolutionary and biomedical research. The Japanese macaque (Macaca fuscata) has contributed to the progress of primatology and neurosciences over 60 years. Despite this importance, the molecular and cellular basis of the Japanese macaque remains unexplored since useful cellular tools are lacking. Here we generated induced pluripotent stem cells (iPSCs) from skin fibroblasts of the Japanese macaque with Sendai virus or plasmid vectors. The Japanese macaque iPSCs (jm-iPSCs) were established under feeder-free culture conditions, but feeder cells turned out to be essential for their maintenance. The jm-iPSCs formed human iPSC-like flat colonies which were positive for pluripotent antigens including alkaline phosphatase, SSEA4, and TRA-1-81. They also expressed endogenous OCT3/4, SOX2, L-MYC, and KLF4 and other pluripotent marker genes. The potential to differentiate into all three germ layers and neural stem cells was confirmed by embryoid body and neurosphere formation, respectively. The jm-iPSCs will provide a robust in vitro tool for investigating the underlying mechanisms of development and physiology studies with the Japanese macaque.
PMID: 30111816