پتانسیل غضروف سازی فیبروبلاست های پوست انسان دریک هیدروژل پپتیدی قابل انقباض نرم با قابلیت خودآرایی
مقاله حاضر یک روش ساده برای به دست آوردن ساختار غضروفی سه بعدی (3D) را با استفاده از کشت فیبروبلاستهای درم طبیعی انسان (hNDFs) در یک داربست نانوالیاف پپتیدی با قابلیت خودآرایی، توضیح می دهد . در روز اول کشت، این ساختارهای سه بعدی تحت تغییرات مورفولوژیکی از جمله  یک فرایند انقباض قابل توجه که در یک ساختار متراکم کوچک به پایان رسید، قرار گرفتند. در طول این فرایند، سیستم به القاء با محیط استاندارد ​​غضروفی حساس شد که این با بیان مارکرهای خاص غضروف بالغ  ثابت شد. در ابتدا مشخص شد که نمونه ها با رنگ toluidine  با گذشت زمان(40-50 روز) آبی رنگ شده که نشان دهنده تولید مقادیر قابل توجهی از گلیکوزآمینوگلیکانها توسط این سیستم است. با PCR کمی، نیز تایید شد که سیستم به طور قابل توجهی سبب افزایش بیان پروتئوگلیکان aggrecan  می شود که شاخص خوبی برای تعهد غضروفی است. علاوه بر این، سطح پروتئینی کلاژن نوع II افزایش یافت ، که مؤید تمایز سیستم به ساختارهای غضروف مانند است. همچنین، طی روزهای اول کشت در محیط کنترل فیبروبلاستهای درم ، توانایی تکثیر سلولها دراین سیستم سه بعدی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. این الگومی تواند در آینده برای به دست آوردن یک منبع اتولوگ سلولی با نمونه برداری ساده از پوست بیمار مورد استفاده قرار گیرد که می تواند به راحتی برای یک درمان ترمیمی کم هزینه و موثر بکار رود.

J Tissue Eng Regen Med. 2013 Jun 4. doi: 10.1002/term.1766. [Epub ahead of print]

Chondrogenic potential of human dermal fibroblasts in a contractile, soft, self-assembling, peptide hydrogel.

Bussmann BM, Reiche S, Marí-Buyé N, Castells-Sala C, Meisel HJ, Semino CE.

Source

Translational Centre for Regenerative Medicine (TRM-Leipzig), Universität Leipzig, Germany.

Abstract

The present paper describes a simple approach to obtain three-dimensional (3D) cartilage constructs using human normal dermal fibroblasts (hNDFs) cultured in a self-assembling peptide nanofibre scaffold. During the first days of culture, the 3D constructs underwent morphological changes consisting of a substantial contraction process that ended in a small compact structure. During this process the system became sensitive to induction with standard chondrogenic medium, evidenced by the expression of specific markers of mature cartilage. First, it was detected that the samples become highly stained with toluidine blue dye over time (40-50 days), indicating that the system produced significantly high amounts of glycosaminoglycans. By quantitative PCR, it was confirmed that the system significantly upregulated the expression of the proteoglycan aggrecan, a good indicator of cartilage commitment. Moreover, collagen type II was upregulated at protein level, confirming that the system differentiated to a chondrocyte-like construct. Additionally, during the first days of culture in control medium analysed hNDFs proliferation capacity in this 3D system was analysed. This platform could be used in the future to obtain an autologous source of cells from a simple patient skin biopsy, which could be easily translated into a low-cost and effective regenerative therapy. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.

Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.

PMID:

23737099