تولید و ویژگی یابی جامع سلول های بنیادی پرتوان القایی برای تحقیقات کاربردی
تاریخ انتشار: یکشنبه 19 خرداد 1398
| امتیاز:
سلول های بنیادی پرتوان القایی(iPSCs) پتانسیل بالایی در مدل سازی بیماری ها، کشف داروها و طب بازساختی دارد. برخلاف پیشرفت های صورت گرفته در روش های بازبرنامه ریزی، تولید iPSCهای با کیفیت بالینی به صورت چالش برانگیز باقی مانده است. کیت بازبرنامه ریزی منحصربفردی که برای اولین بار در این جا گزارش شده است(CTS CytoTune-iPS 2.1)، به طور اختصاصی برای تحقیقات بالینی و کاربردی طراحی شده است. معایب و نواقص کار شناسایی شده است و روش هایی ایجاد شده است که برای تولید مدام iPSCs از انواع سلول های مختلف استفاده می شوند. کلون های حاصل در معرض ویژگی یابی قرار گرفتند که شامل ثابت کردن پرتوان، حفظ یکپارچگی ژنومی و تقویت بانک سلول از طریق آرایه ای از روش های مولکولی شامل میکرواری با رزولوشن بالا و توالی یابی نسل جدید بود. ایجاد یک مدیریت کاری یکپارچه عاری از محصولات جانوری که با ویژگی یابی جامع ترکیب شده باشد، تولید iPSCهای با کیفیت بالا که برای تحقیقات بالینی و کاربردی مناسب باشند را نوید می دهد.
Regen Med. 2019 May 22. doi: 10.2217/rme-2018-0148. [Epub ahead of print]
Generation and comprehensive characterization of induced pluripotent stem cells for translational research.
MacArthur CC1, Pradhan S1, Wetton N1, Zarrabi A1, Dargitz C1, Sridharan M1, Jackson S1, Pickle L1, Lakshmipathy U1.
Abstract
Induced pluripotent stem cells (iPSCs) hold immense potential in disease modeling, drug discovery and regenerative medicine. Despite advances in reprogramming methods, generation of clinical-grade iPSCs remains a challenge. Reported here is the first off-the-shelf reprogramming kit, CTS CytoTune-iPS 2.1, specifically designed for clinical and translational research. Workflow gaps were identified, and methods developed were used to consistently generate iPSC from multiple cell types. Resulting clones were subjected to characterization that included confirmation of pluripotency, preservation of genomic integrity and authentication of cell banks via an array of molecular methods including high resolution microarray and next-generation sequencing. Development of integrated xeno-free workflows combined with comprehensive characterization offers generation of high-quality iPSCs that are suited for clinical and translational research.
PMID: 31115261