تزریق درون آمنیوتیکی سلول های بنیادی مزانشیمی بلوغ ریوی را در رت های مدل برای فتق دیافراگمی مادرزادی
تاریخ انتشار: شنبه 27 مهر 1398
| امتیاز:
هدف:
ما در صدد ارزیابی اثر سلول های بنیادی مزانشیمی انسانی(hMSCs) روی فتق دیافراگمی مادرزادی(CDH) بوسیله تزریق درون آمنیوتیکی در مدل رتی CDH بودیم.
روش ها:
نیتروفن(100 میلی گرم) در روز 5/9 جنینی به رت های باردار تزریق شد و سپس در روز 18 سلول های بنیادی مزانشیمی انسانی(یک میلیون سلول) یا PBS به حفره آمینوتیک هر کدام تزریق شد و جنین ها در روز 21 بدست آمدند. ریه های جنینی به گروه های طبیعی، CDH،CDH-MSCs دسته بندی شدند. برای تعیین بلوغ ریوی، ما ساختار بافتی آلوئولار را بوسیله H&E و ویگرت و شریان آلوئولار را بوسیله الاستیکا ون گیسون(EVG) ارزیابی کردیم. TTF-1 یک مارکر سلول های اپی تلیالی آلوئولار نوع II نیز برای رنگ آمیزی ایمنوهیستوشیمی و RT-PCR ارزیابی شد.
نتایج:
نرخ بقای بعد از تزریق درون آمنیوتیکی 1/72 درصد بود. گروه CDH-hMSCs در مقایسه با گروه CDH آلوئول و سپتای ثانویه بیشتری داشت(p < 0.05). گروه CDH-hMSCs فضاهای هوایی و دیواره آلوئولی نازک تری در مقایسه با گروه CDH داشت(p < 0.05). ضخامت مدیا و ادوانتشیای شریان ریوی در گروه CDH-hMSCs به طور قابل توجهی بهتر بود (p < 0.001) و سلول های TTF-1 مثبت به طور قابل توجه کمتری در مقایسه با گروه CDHوجود داشت (p < 0.001).
جمع بندی:
این نتایج نشان می دهد که تزریق درون آمنیوتیکی سلول های بنیادی مزانشیمی انسانی پتانسیل درمانی فتق دیافراگمی مادرزادی را دارد.
Pediatr Surg Int. 2019 Sep 26. doi: 10.1007/s00383-019-04561-7. [Epub ahead of print]
An intra-amniotic injection of mesenchymal stem cells promotes lung maturity in a rat congenital diaphragmatic hernia model.
Takayama S1,2, Sakai K3, Fumino S3, Furukawa T3, Kishida T4, Mazda O4, Tajiri T3.
Abstract
PURPOSE:
We aimed to evaluate the effect of human mesenchymal stem cells (hMSCs) on congenital diaphragmatic hernia (CDH) by intra-amniotic injection in a rat CDH model.
METHODS:
Nitrofen (100 mg) was administered to pregnant rats at E9.5. hMSCs (1.0 × 106) or PBS was injected into each amniotic cavity at E18, and fetuses were harvested at E21. The fetal lungs were classified into normal, CDH, and CDH-hMSCs groups. To determine the lung maturity, we assessed the alveolar histological structure by H&E and Weigert staining and the alveolar arteries by Elastica Van Gieson (EVG) staining. TTF-1, a marker of type II alveolar epithelial cells, was also evaluated by immunohistochemical staining and real-time reverse transcription polymerase chain reaction.
RESULTS:
The survival rate after intra-amniotic injection was 72.1%. The CDH-hMSCs group had significantly more alveoli and secondary septa than the CDH group (p < 0.05). The CDH-hMSCs group had larger air spaces and thinner alveolar walls than the CDH group (p < 0.05). The medial and adventitial thickness of the pulmonary artery in the CDH-hMSCs group were significantly better (p < 0.001), and there were significantly fewer TTF-1-positive cells than in the CDH group (p < 0.001).
CONCLUSION:
These results suggest that intra-amniotic injection of hMSCs has therapeutic potential for CDH.
PMID: 31559457