پتانسیل تمایز استخوانی و دندانی سلول های بنیادی پالپ دندان جداسازی شده از بافت های ملتهب پالپ دندان(I-DPSCs) بوسیله دو روش مختلف
تاریخ انتشار: یکشنبه 15 دی 1398
| امتیاز:
هدف: هدف مطالعه حاضر جداسازی سلول های بنیادی از بافت ملتهب پالپ دندان(I-DPSCs) و مطالعه ویژگی هایی مانند مارکرهای سطحی، پتانسیل تمایز استخوانی/دندانی بین روش های فرا رشد(OG) و هضم آنزیمی(COL) بود. مواد و روش ها: I-DPSCs بدست آمده بوسیله هر دو روش برای بیان مارکرهای سلول های بنیادی مزانشیمی و بوسیله فلوسایتومتری آنالیز شددند. فعالیت متابولیک سلول های جداسازی شده بوسیله سنجش MTT آنالیز شد. فعالیت آلکالین فسفاتازی(ALP) و رنگ آمیز آلیزارین رد برای آنالیز پتانسیل استخوان زایی سلول های جداسازی شده انجام گرفت. تمایز استخوانی/دندانی بوسیله چک کردن بیان پروتئین دنتین ماتریکس 1(DMP1)، دنتین سیالوفسفوپروتئین(DSPP)، ALP و BGLAP بوسیله Real-time PCR صورت گرفت. نتایج: سلول های جداسازی شده برای مارکرهای مزانشیمی CD90، CD105 و CD73 مثبت بوده و برای مارکرهای CD14، CD45 و STRO-1 منفی بودند. سنجش MTT نشان داد که I-DPSCs جداسازی شده بوسیله روش OG فعالیت متابولیکی بیشتری در مقایسه با سلول های جداسازی شده با روش COL دارا بودند. با این حال، تمایز استخوانی/دندانی به نفع سلول های جداسازی شده بوسیله روش COL بودند. جمع بندی: اگرچه نرخ متابولیک سلولی در OG بیشتر بود، تمایز استخوانی /دندانی در روش COL بیشتر بود که نشان دهنده این امر بود که روش جداسازی و شرایط کشت روی ظرفیت تمایزی سلول های جداسازی شده اثر می گذارد.
Acta Odontol Scand. 2019 Dec 19:1-9. doi: 10.1080/00016357.2019.1702716. [Epub ahead of print]
Osteogenic and odontogenic differentiation potential of dental pulp stem cells isolated from inflamed dental pulp tissues (I-DPSCs) by two different methods.
Gopinath VK1, Soumya S2, Jayakumar MN2.
Abstract
Objective: The objective of the present study is to isolate stem cells from inflamed dental pulp tissues (I-DPSCs) and study the characteristic such as surface markers, osteo/odontogenic differentiation potential between the outgrowth (OG) and enzymatic digestion (COL) methods.Materials and methods: I-DPSCs harvested by both methods were analysed for Mesenchymal Stem Cell marker expression by flow cytometry. The metabolic activity of the isolated cells was assessed by MTT assay. The Alkaline Phosphatase (ALP) and Alizarin red staining was done to analyse the osteogenic potential of isolated cells. The osteo/odontogenic differentiation was done by checking the expression of Dentine Matrix Protein 1 (DMP1), Dentine Sialophosphoprotein (DSPP), ALP and Bone Gamma-Carboxyglutamate Protein (BGLAP) by Real time PCR.Results: The isolated cells were positive for MSC markers such as CD-90, CD-105 and CD-73 and negative for CD-14, CD-45 and STRO-1. MTT assay indicated that the I-DPSCs from OG method showed higher metabolic activity than cells from COL. However, the osteo/odontogenic differentiation was in favour of cells isolated by COL method.Conclusion: Although the cell metabolic rate was more in OG, the osteo/odontogenic differentiation was higher in COL, suggesting that the isolation method and culture conditions do affect the differentiation capacity of isolated cells.
PMID: 31855089