اثر میکرو وزیکول های مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی روی تمایز مگاکاریوسیتی سلول های بنیادی خون ساز CD34+
تاریخ انتشار: پنجشنبه 25 اردیبهشت 1399
| امتیاز:
هدف: سلول های بنیادی مزانشیمی(MSCs) سیتوکین های خون ساز، فاکتورهای رشد و میکرو وزیکول ها(MVs) را آزاد می کنند که از سلول های بنیادی خون ساز(HSCs) حمایت می کنند. میکرو وزیکول های آزاد شده از سلول های مختلف، نقش حیاتی را در عملکردهای زیسیتی سلول های والدی آن ها بازی می کنند. میکرووزیکول های مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی(MSCs-MVs) حاوی میکروRNAs و پروتئین ها با نقش های کلیدی در تنظیم خون سازی هستند. خون بند ناف (UCB) یک منبع برای پیوند هستند اما ریکاوری بلند مدت پلاکت ها یک مشکل اصلی است. بنابراین ما تمایل داشتیم که نشان دهیم که MSCs-MVs قادر بهبود تمایز سلول های CD34+ مشتق از خون بند ناف به رده مگاکاریوسیتی هستند. روش ها: در این مطالعه توصیفی، سلول های بنیادی مزانشیمی در محیط DMEM کشت شدند تا محیط رویی آن ها جمع آوری شده و برای جداسازی میکرووزیکول ها اولتراسانتریفیوژ شوند. سلول های بنیادی خون ساز با استفاده از روش MACS از خون بند ناف جداسازی شده و در IMDM کامل شده با سیتوکین ها و میکرووزیکول ها در سه شرایط متفاوت کشت شدند. تمایز مگاکاریوسیتی از طریق بیان مارکرها و ژن های خاص بعد از 73 ساعت ارزیابی شد و داده ها بوسیله t-test ارزیابی شدند(P<0.05). نتایج: بیان مارکرهای مگاکاریوسیتی خاص(CD41 و CD61) در حضور غلظت های مختلف MSC-MVs هیچ تفاوت قابل توجهی را نشان نداد. هم چنین، بیان ژن های خاص رده مگاکاریوسیتی با گروه کنترل مقایسه شد. بیان GATA2 و c-Mpl به طور قابل توجهی کاهش یافت. جمع بندی: MSC-MVs می تواند بیان ژن های مگاکاریوسیتی اختصاصی را بهبود ببخشد؛ با این نحال، هیچ بیان قابل توجهی از CD مارکرها وجود نداشت. مطالعات بیشتر از جمله ارزیابی مراحل بعدی تمایز مگاکاریوسیتی نیازمند ارزیابی تولید و تخریب پلاکت ها است.
Adv Pharm Bull. 2020 Jun;10(2):315-322. doi: 10.34172/apb.2020.038. Epub 2020 Feb 20.
Effect of Mesenchymal Stem Cell-derived Microvesicles on Megakaryocytic Differentiation of CD34+ Hematopoietic Stem Cells.
Aqmasheh S1, Shamsasenjan K1, Khalaf Adeli E2, Movassaghpourakbari A3, Akbarzadehlaleh P4, Pashoutan Sarvar D5, Timari H1.
Abstract
Purpose: Mesenchymal stem cells (MSCs) release hematopoietic cytokines, growth factors, and Microvesicles (MVs) supporting the hematopoietic stem cells (HSCs). MVs released from various cells, playing a crucial role in biological functions of their parental cells. MSC-derived MVs contain microRNAs and proteins with key roles in the regulation of hematopoiesis. Umbilical cord blood (UCB) is a source for transplantation but the long-term recovery of platelets is a main problem. Therefore, we intend to show that MSC-MVs are able to improve the differentiation of UCB-derived CD34+ cells to megakaryocyte lineage. Methods: In this descriptive study, MSCs were cultured in DMEM to collect the culture supernatant, which was ultracentrifuged for the isolation of MVs. HSCs were isolated from UCB using MACS method and cultured in IMDM supplemented with cytokines and MVs in three different conditions. Megakaryocyte differentiation was evaluated through the expression of specific markers and genes after 72 hours, and the data was analyzed by t test (P<0.05). Results: The expression of specific megakaryocyte markers (CD41 and CD61) in the presence of different concentrations of MSC-MVs did not show any significant difference. Also, the expression of specific genes of megakaryocyte lineage was compared with control group. The expression of GATA2 and c-Mpl was significantly increased, GATA1 was not significantly decreased, and FLI1 was significantly decreased. Conclusion: MSC-MVs could improve the expression of specific megakaryocyte genes; however, there was no significant expression of CD markers. Further studies, including the evaluation of late stages of megakaryocyte differentiation, are required to evaluate platelet production and shedding.
PMID: 32373502