اثرات زمان ذخیره سازی بر میزان بقاء خون بند ناف
سابقه و هدف: نگهداری خون بند ناف (CB) به طور فزاینده ای به عنوان منبع سلولی برای بازسازی مغزاستخوان در بیماران تحت پیوند سلول های بنیادی خونساز استفاده می شود. تاخیر در انجماد ممکن است بر میزان بقاء سلولها تاثیر منفی گذاشته ، در نتیجه توانایی بالقوه آنها برای پیوندپذیری کاهش
یابد.
طراحی مطالعه و روشها : تاثیر تاخیر درانجماد تا 3 روزبر میزان بقاء هر دو جمعیت سلولی   +CD45 و +CD34 در 28 نمونه بند ناف اهدایی با حجم 15.4 ± 58.40  میلی لیتر (محدوده 39.4- 107.4 میلی لیتر ) مورد بررسی قرار گرفت تا ثابت شود که آیا زمان ذخیره سازی پیش از انجماد می تواند از زمان فعلی 24 ساعت ما  تا 48 ساعت دربانک های بند ناف دیگر افزایش یابد. میزان بقاء در سه روز متوالی ، هم قبل و هم بعد از انجماد توسط فلوسیتومتری با استفاده از روش 7 – aminoactinomycin- D (AAD) وآنکسین V -  مورد بررسی قرار گرفت .

نتایج : نتایج با استفاده از 7 - AAD و وآنکسین V نشان داد میزان بقاء سلولها + CD34 قبل از انجماد تا بیش از 3 روز بالا باقی مانده است (>92.33 ± 4.11%)، در حالی که درصد بقاء سلول های + CD45  از  4.97 ± 86.36 درصد به 7.78± 66.24  درصد ( P <0.0001) طی روز 3 کاهش یافت. زمان ذخیره سازی به طور قابل توجهی بر میزان بقاء سلول های + CD34 پس از انجماد تاثیر می گذارد . با استفاده از 7 - AAD ، متوسط بقاء سلول های +​​CD34  در حدود 5 ٪ به ازای هر روز اضافی از6.27± 84.30 درصد در روز 1 به  7.44± 79.01  درصد ( P < 0.0057 ) در روز 2 و 7.54±73.95   درصد (p < 0.0001) در روز 3 کاهش یافت. با رنگ آمیزی آنکسین Vمیزان بقاء سلول های + CD34 حدود 7 ٪ در هر روز اضافی از  8.47 ± 77.17  درصد در روز 1 به 13.30± 69.56  درصد ( P < 0.0194 ) در روز 2 و به  15.22±  62.89 درصد ( P < 0.0002 ) در روز 3 کاهش یافت.

نتیجه گیری: این مطالعه نشان می دهد که زمان طولانی ذخیره سازی پیش از انجماد تاثیر منفی گسترده برمیزان بقاء سلول ها داشته و باید از آن اجتناب کرد.

Transfusion. 2013 Nov 14. doi: 10.1111/trf.12481. [Epub ahead of print]

Storage time affects umbilical cord blood viability.

Guttridge MG, Soh TG, Belfield H, Sidders C, Watt SM.

Source

NHS Blood and Transplant, Bristol, UK.

Abstract

BACKGROUND:

Cryopreserved umbilical cord blood (CB) is increasingly used as a cell source to reconstitute marrow in hematopoietic stem cell transplant patients. Delays in cryopreservation may adversely affect cell viability, thereby reducing their potential for engraftment after transplantation.

STUDY DESIGN AND METHODS:

The impact of delayed cryopreservation for up to 3 days on the viability of both CD45+ and CD34+ cell populations in 28 CB donations with volumes of 58.40 ± 15.4 mL (range, 39.4-107.4 mL) was investigated to establish whether precryopreservation storage time could be extended from our current time of 24 to 48 hours in line with other CB banks. Viability was assessed on 3 consecutive days, both before and after cryopreservation, by flow cytometry using 7-aminoactinomycin D (7-AAD) and annexin V methods.

RESULTS:

The results using 7-AAD and annexin V indicated the viability of CD34+ cells before cryopreservation remained high (>92.33 ± 4.11%) over 3 days, whereas the viability of CD45+ cells decreased from 86.36 ± 4.97% to 66.24 ± 7.78% (p < 0.0001) by Day 3. Storage time significantly affected the viability of CD34+ cells after cryopreservation. Using 7-AAD, the mean CD34+ cell viability decreased by approximately 5% per extra day in storage from 84.30 ± 6.27% on Day 1 to 79.01 ± 7.44% (p < 0.0057) on Day 2 and to 73.95 ± 7.54% (p < 0.0001) on Day 3. With annexin V staining CD34+ cell viability fell by approximately 7% per extra day in storage from 77.17 ± 8.47% on Day 1 to 69.56 ± 13.30% (p < 0.0194) on Day 2 and to 62.89 ± 15.22% (p < 0.0002) on Day 3.

CONCLUSION:

This study demonstrates that extended precryopreservation storage adversely affects viability and should be avoided.

PMID: 24224530