ویژگی های سلول کلوئید انسان و مهار رشد با عصاره سلول بنیادی ژله وارتون انسان

کلوئیدها  تومورهای لاستیک شکل محکمی هستند که در اطراف مرزهای زخم انسان رشد می کنند و درمان آنها موفقیت محدودی داشته است. خواص و وضعیت رشد آنها به درستی مشخص نیست و پیشنهاد شده است که فنوتیپ نئوپلاستیک خوش خیم شبه سلولهای بنیادی دریک ریزمحیط سیتوکینی تغییریافته، تکثیر سلولی غیرقابل کنترل آنها را تحریک می کند. تغییر نیچ سلول های بنیادی ممکن است یک روش جالب برای پیشگیری از آن باشد. ما وضعیت رشد ، ویژگی های بنیادینگی و تومورزایی سلول های کلوئیدی را درکشت طولانی مدت مورد مطالعه قراردادیم . از آنجاییکه سلول های بنیادی ژله وارتون انسان ( hWJSCs ) سطح بالایی از سیتوکین ها را ترشح کرده و خواص ضد تومورزایی دارند، ما نقش آنها را درمهار رشد کلوئید در شرایط آزمایشگاهی مورد بررسی قرار دادیم. سلول های کلوئیدی به آسانی در هر دو کشت چسبنده و معلق رشد کرده و سطح بالایی از مارکرهای سطحی مزانشیمی (CD) و مارکرهای سلولهای فیبروبلاست مرتبط با تومور ( TAF ) را تا پاساژ 10 بیان کردند . هنگامی که آنها در معرض تکرار دوز محیط کشت ​​hWJSC  ( hWJSC -CM ) و عصاره ​​hWJSC ( hWJSC -CL ) هر 72 ساعت به مدت 9 روز قرار گرفتند، رشد آنها  با کاهش بیان  CD و TAF مهار شد . در روزهای 3، 6 و 9 سلول های کلوئیدی تیمار شده کاهش خطی تکثیر سلولی ( در حضور BrdU ) ، افزایش Annexin V- FITC و سلول های TUNEL مثبت ، وقفه درچرخه سلولی و مهار مهاجرت در آزمایش خراش زخم را نشان دادند. ایمونوسیتوشیمی و  qRT–PCR کاهش قابل توجهی را در بیان ژن TAF و ژن مرتبط با ضد آپوپتوز ( SURVIVIN ) و افزایش بیان ژن های مرتبط با اتوفاگی(  BAX ، ATG5 ، ATG7 ، BECLIN - 1 ) را تایید کرد. نتایج نشان می دهد که hWJSCs و یا مولکول های ترشح شده توسط آنها ممکن است ارزش درمانی برای درمان کلوئید را داشته باشند.

J Cell Biochem. 2013 Nov 22. doi: 10.1002/jcb.24724. [Epub ahead of print]

Human Keloid Cell Characterization and Inhibition of Growth with Human Wharton's Jelly Stem Cell Extracts.

Fong CY, Biswas A, Subramanian A, Srinivasan A, Choolani M, Bongso A.

Source

Department of Obstetrics and Gynaecology, Yong Loo Lin School of Medicine, National University Health System, National University of Singapore, Kent Ridge, Singapore, 119228.

Abstract

Keloids are firm rubbery growths that grow beyond the boundaries of human wounds and their treatment has met with limited success. Their properties and growth behavior have not been properly characterized and it has been suggested that a benign neoplastic stem cell-like phenotype in an altered cytokine microenvironment drives their uncontrolled cell proliferation. Modification of the stem cell niche may be an attractive approach to its prevention. We studied the growth behavior, stemness and tumorigenic characteristics of keloid cells in prolonged culture. Since human Wharton's jelly stem cells (hWJSCs) secrete high levels of cytokines and have anti-tumorigenic properties we explored its role on the inhibition of keloid growth in vitro. Keloid cells grew readily in both adherent and sphere culture and expressed high levels of mesenchymal CD and tumor-associated fibroblast (TAF) markers up to passage 10. When they were exposed to repeat doses of hWJSC conditioned medium (hWJSC-CM) and lysate (hWJSC-CL) every 72 h up to 9 days their growth was inhibited with a reduction in CD and TAF marker expression. On days 3, 6 and 9 treated keloid cells showed linear decreases in cell proliferation (BrdU), increases in Annexin V-FITC and TUNEL-positive cells, interruptions of the cell cycle and inhibition of migration in scratch-wound assays. Immunocytochemistry and qRT-PCR confirmed a significant downregulation of TAF and anti-apoptotic-related gene (SURVIVIN) expression and upregulation of autophagy-related (BAX, ATG5, ATG7, BECLIN-1) gene expression. The results suggest that hWJSCs or molecules secreted by them may be of therapeutic value in the treatment of keloids. J. Cell. Biochem. © 2013 Wiley Periodicals, Inc.

PMID: 24265231