اثر پیش برنده هپارین درتکثیر مگاکاریوسیت های مشتق از سلول های + CD34 خون بندناف در شرایط ازمایشگاهی
مقدمه : تزریق مگاکاریوسیت های (MKS ) تکثیر شده درشرایط ازمایشگاهی برای حفظ بهبود پلاکت پس از پیوند سلول های بنیادی خونساز خون بند ناف ( CB ) مطرح شده است. دراین مطالعه ، ما اثر هپارین را بر تشکیل واحد تشکیل دهنده  مگاکاریوسیت ها ( CFU - MKS ) و تکثیر مگاکاریوسیت های مشتق از سلول های + CD34خون بندناف در شرایط ازمایشگاهی بررسی کردیم.

مواد و روشها: سلول های +CD34  با ترکیبی از ترومبوپویتین ((TPO  ، فاکتور سلول بنیادی (SCF) ، لیگاند FLT3  (FL) ، IL-6 و IL- 11  که با سرم و هپارین اتولوگ مکمل شده بودند طی 14 روز القاء شدند. سلول های تکثیر شده به روش فلوسیتومتری و کشت  CFU - MK آنالیز شدند.

نتایج : درمقایسه با کشت های گروه کنترل ، این ترکیب 5 فاکتوره وهپارین به طور معنی داری (p ≤ 0.05) تعداد بالاتر CFU - MKS و سلولهای +CD41  را در روز 7 و 14 القاء کرد و سلول های +CD41  سطوح هیپرپلوئیدی( ≥ 8N ) و پلاکت را در روز 14 نشان دادند. پلاکت های مشتق شده از کشت پس از تحریک کلاژن فعال شدند.
نتیجه گیری : هپارین به طور قابل توجهی می تواند موجب افزایش اثرات محرک ترکیبی از TPO ، SCF ، FL ، IL-6 و IL- 11 و سرم اتولوگ در تولید CFU -MK، MK و پلاکت از سلول های + CD34  خون بندناف شود. این سیستم توسعه می تواند یک روش امید بخش برای تولید CFU - MKS و سلول های MKS درانتقال خون برای حفظ بازسازی پلاکت  به دنبال پیوند خون بندناف باشد.

Transfus Med Hemother. 2013 Oct;40(5):344-350. Epub 2013 Sep 19.

Promoting Effects of Heparin on ex vivo Expansion of Megakaryocytopoiesis from Human Cord Blood CD34+ Cells.

Maurer AM, Gezer A.

Source

Department of Hematology, School of Medicine, Marmara University, Istanbul, Turkey.

Abstract

INTRODUCTION:

Transfusion of ex vivo expanded megakaryocytes (MKs) has been proposed to sustain platelet recovery after cord blood (CB) hematopoietic stem cell transplantation. In this study, we investigated the effects of heparin on ex vivo colony forming unit-megakaryocytes (CFU-MKs) and MKs expansion from CB CD34+ cells.

METHODS:

CB CD34+ cells were stimulated by a combination of thrombopoietin (TPO), stem cell factor (SCF), Flt3-Ligand (FL), IL-6, and IL-11 supplemented with autologous serum and heparin during 14 days. Expanded cells were analyzed by flow cytometry and cultured in a CFU-MK assay.

RESULTS:

Compared to control cultures, the 5-factor combination with heparin induced significantly (p ≤ 0.05) higher numbers of: CFU-MKs and CD41+ cells on days 7 and 14; CD41+ cells displaying hyperploidy levels (≥8N) on day 14; platelets on day 14. The culture-derived platelets were activated upon collagen stimulation.

CONCLUSION:

Heparin can significantly enhance the stimulating effects of a combination of TPO, SCF, FL, IL-6, and IL-11 supplemented with autologous serum on CFU-MK, MK, and platelet production from CB CD34+ cells. This expansion system could represent a promising method to generate CFU-MKs and MKs cells for transfusion to sustain platelet reconstitution following CB transplantation.

PMID: 24273488