سلولهای استرومای مزانشیمی مشتق از آمنیون یک فنوتیپ مزانشیمی- اپیتلیالی را درکشت نشان می دهند
پرده آمنیوتیک یک منبع غنی از سلول های استرومایی مزانشیمی (hAMSC ) چند توان است، که به راحتی در دسترس بوده و پتانسیل استفاده در طب ترمیمی  و مهندسی بافت را داراست . قبل از اینکه این سلول ها بطور بالینی استفاده شوند، تعیین خصوصیات دقیق آنها لازم است ، به ویژه از آنجاییکه مشخص شده سلول های اولیه فنوتیپ خود را در محیط کشت تغییر می دهند. ما فنوتیپ مزانشیمی سلول های استرومایی مزانشیمی آمنیون را در مراحل مختلف پس از جداسازی با استفاده از روش ایمونوهیستوشیمی بررسی کردیم. مدت کوتاهی پس از جداسازی ( 1 روز ) ، 92 ٪ ( ± 7 ٪ ) از hAMSC مارکر مزانشیمی ویمنتین را بیان کردند ، 2٪ ( ± 1٪ ) برای مارکر اپیتلیالی سیتوکراتین - 7 رنگ گرفتند و 5 درصد ( 4 ٪ ± ) هر دو این مارکرها را بیان کردند . پس از 5 روز ، سلول های مثبت برای هر دو مارکر به 7 ٪ ( ± 3٪ ) افزایش یافت ، در حالی که بیان تنها ی سیتوکراتین - 7 و یا ویمنتین بدون تغییر (2 ٪±  1 ٪ و 1٪ ± 92٪ ، به ترتیب) باقی ماند. پس از پاساژ اول ، تمام سلول های چسبیده به ظرف ویمنتین مثبت بودند ، در حالی که 54 درصد ( 9 ٪ ± ) هر دو مارکر سیتوکراتین -7 و ویمنتین را بیان کردند . بنابراین، ما نتیجه می گیریم که تحت شرایط کشت، hAMSC یک فنوتیپ مزانشیمی- اپیتلیالی ترکیبی را کسب می کنند. همچنین انجام آزمایش میکروسکوپی در طول روز اول پس از جداسازی برای تشخیص آلودگی با سلول های اپیتلیالی مشتق از آمنیون در کشت  سلول های استرومایی مزانشیمی آمنیون انسان ضروری است.

Cell Tissue Bank. 2013 Dec 11. [Epub ahead of print]

Amnion-derived mesenchymal stromal cells show a mesenchymal-epithelial phenotype in culture.

König J, Lang I, Siwetz M, Fröhlich J, Huppertz B.

Author information

• Institute of Cell Biology, Histology and Embryology, Medical University of Graz, Harrachgasse 21/7, 8010, Graz, Austria.

Abstract

The amnionic membrane is a rich source of multipotent mesenchymal stromal cells (hAMSC), which are readily available and show a potential use in regenerative medicine and tissue engineering. Before these cells can be applied clinically, careful characterization is necessary, especially as primary cells are known to change their phenotype in culture. We analyzed the mesenchymal phenotype of hAMSC at different stages after isolation using immunohistochemistry. Shortly after isolation (1 day), 92 % (±7 %) of the hAMSC expressed the mesenchymal marker vimentin, 2 % (±1 %) stained for the epithelial marker cytokeratin-7 and 5 % (±4 %) co-expressed these markers. After 5 days, the double positive cells slightly increased to 7 % (±3 %), while exclusive expression of cytokeratin-7 or vimentin remained unchanged (1 % ± 2 % and 92 % ± 1 %, respectively). After the first passage, all attached cells were vimentin-positive, while 54 % (±9 %) co-expressed cytokeratin-7 and vimentin. Thus, we conclude that under culture, hAMSC adopt a hybrid mesenchymal-epithelial phenotype. It is also essential to perform microscopical examination during the first days after isolation to detect contaminations with human amnion-derived epithelial cells in cultures of hAMSC.

PMID: 24326460