کیفیت عملکرد سلول های بنیادی / پیش ساز خونساز خون بند ناف ذخیره شده انسان

سابقه و هدف: پیوند خون بند ناف ذخیره شده ( UCB ) را می توان برای درمان بسیاری از بیماری های ایمنی و هماتولوژیک استفاده کرد. در این مطالعه ما به بررسی کیفیت خون بند ناف ذخیره شده به مدت 2 سال (گروه I)، 4 سال (گروه II) و 6 سال (گروه III ) می پردازیم.
مواد و روشها: پارامترها و روش های زیر برای بررسی واحد های مجزای خون بندناف ذخیره شده مورد استفاده قرار گرفت:  تعداد کل سلول های هسته دار ( TNC ) ، ماندگاری سلولها ، روش CFU -GM ، فعال شدن سلول T در in vitro  و پیوندپذیری سلول های بنیادی خونساز در موش های NOD / SCID در in vivo.
نتایج : میزان بازیابی TNC برای گروه I ، II و III به ترتیب 106·2 ± 6·17% ، 96.69 ± 6.39٪ و 5.27 ± 100.38 ٪ و میانگین درصد سلول های زنده پس از ذوب کردن 86.88 ٪ ، 86.38 ٪ و 87.43 ٪ بود. هنگامی که TNC با غلظت 5 × 10³  کشت داده شدند ، تعداد CFU -GM  برابر با 13.6 (گروه I) ، 13.8 (گروه II) ، 14.2 (گروه III ) و 14.7 ( خون بندناف تازه ) بود. ما با ارزیابی سلول های +huCD25 فعال شده تایید کردیم که سلول های T +huCD4 و huCD8 +  در UCB ذخیره شده از نظرعملکردی پاسخگو می باشد. علاوه براین ، درصد سلول های +huCD45  در مغز استخوان 4·32 ± 1·29%  (گروه I) ،  4·48 ± 1·11%  (گروه II) ، 4·40% ± 1·12%  (گروه III ) و  4·50% ± 0·66%  ( UCB تازه ) و در خون محیطی 3.08 ± 14.69 ٪ (گروه I) ، 4.05 ± 15.24 ٪ (گروهII )، 15·74 ± 3·43%  (گروه III ) و 17·48 ± 3·74% ( UCB تازه ) در موش NOD / SCID دریافت کننده سلول های + huCD34 جدا شده بود.
نتیجه گیری : این نتایج نشان داد که واحد های خون بندناف ذخیره شده بطورموثری شکل مناسب عملکردی خود را بازیافته و برای پیوند مناسب هستند.

Vox Sang. 2014 Feb 12. doi: 10.1111/vox.12132. [Epub ahead of print]

Quality of functional haematopoietic stem/progenitor cells from cryopreserved human umbilical cord blood.

Eom JE¹, Kim DS, Lee MW, Yu DK, Jin KS, Shin S, Lee SH, Sung KW, Koo HH, Yoo KH.

Abstract

BACKGROUND AND OBJECTIVES:

Transplantation of cryopreserved umbilical cord blood (UCB) can be used to treat a multitude of haematologic and immunological diseases. In this study, we examined the quality of UCB cryopreserved for 2 (group I), 4 (group II) and 6 (group III) years.

METHODS:

The following parameters and procedures were used to test individual units of cryopreserved UCB: the number of total nucleated cells (TNC), cell viability, CFU-GM assay, T-cell activation in vitro and haematopoietic stem cell engraftment in NOD/SCID mice in vivo.

RESULTS:

The TNC recovery rates for groups I, II and III were 106·2 ± 6·17%, 96·69 ± 6·39% and 100·38 ± 5·27%, respectively, and the mean percentages of viable cells after thawing were 86·88%, 86·38% and 87·43%. When TNC were plated at 5 × 10³ , the number of CFU-GM was 13·6 (group I), 13·8 (group II), 14·2 (group III) and 14·7 (fresh UCB). We confirmed that the huCD4⁺ and huCD8⁺ T cells within cryopreserved UCB are functionally responsive by assessment of activated huCD25⁺ cells. Moreover, the percentage of huCD45⁺ cells in the bone marrow was 4·32 ± 1·29% (group I), 4·48 ± 1·11% (group II), 4·40% ± 1·12% (group III) and 4·50% ± 0·66% (fresh UCB), and that in the peripheral blood was 14·69 ± 3·08% (group I), 15·24 ± 4·05% (group II), 15·74 ± 3·43% (group III) and 17·48 ± 3·74% (fresh UCB) in NOD/SCID mice infused with isolated huCD34⁺ cells.

CONCLUSION:

These results indicated that cryopreserved UCB units efficiently retrieve in functionally competent form and are suitable for transplantation.

PMID: 24517183