مطالعه تأثیر سرم خون بند ناف بر کشت ازمایشگاهی سلول های اپیتلیال لیمبوس انسانی

پیوند سلول های لیمبوس یک روش موثر برای بازسازی حدت بینایی دربیماران مبتلا به اختلالات شدید سطح چشم است. کشت سلول های بنیادی اپیتلیالی لیمبوس با سرم جنین گاوی برای پیوند یک درمان امیدوار کننده برای بازسازی سطح چشم در کمبود شدید سلول های بنیادی لیمبال ناشی از سندرم استیون جانسون، آسیب های شیمیایی و یا حرارتی بوده است. این تکنیک " سلول درمانی " در سراسر جهان پذیرفته شده است اما هزینه کشت سلولها برای پیوند بالا است. هدف از این مطالعه بررسی تأثیر سرم خون بند ناف به جای سرم جنین گاوی بر رشد سلول های اپیتلیال لیمبال انسان بود. گروه ما آزمایشاتی را با سرم خون بند ناف انسان که از اهدا کنندگان داوطلب بدون هزینه به دست آمده بود، انجام داد.

استفاده از سرم خون بند ناف انسان به جای سرم جنین گاوی برای کشت آزمایشگاهی سلول های بنیادی لیمبوس به ما در کاهش هزینه های کشت کمک می کند. بافت تازه لیمبوس انسان از اجساد اهدایی بر روی غشای آمنیوتیک سالم و بدون سلول کشت داده شدند. سلول ها در شرایط آزمایشگاهی با محیط کشت حاوی سرم خون بند ناف انسان تکثیر شدند. از واکنش رونویسی معکوس زنجیره پلیمراز  و سیتوشیمی ایمونوفلورسانس سلول های بنیادی اپتلیالی لیمبوس کشت شده انسانی جهت شناسایی این سلول استفاده شد.

J Ocul Biol Dis Infor. 2013 May 4;5(3-4):77-82. doi: 10.1007/s12177-013-9106-5. eCollection 2012.

Effect of cord blood serum on ex vivo human limbal epithelial cell culture.

Chakraborty A¹, Dutta J², Das S¹, Datta H³.

Abstract

Limbal cell transplantation is an efficacious procedure for rehabilitation of visual acuity in patients with severe ocular surface disorders. Cultivation of limbal epithelial stem cell with fetal bovine serum for transplantation has been a promising treatment for reconstructing the ocular surface in severe limbal stem cell deficiency caused by Steven Johnson syndrome, chemical or thermal injury. This technique of "cell therapy" has been accepted worldwide but the cost of cultivating the cells for transplantation is high. The objective of this study was to investigate the effect of cord blood serum in place of fetal bovine serum on the growth of human limbal epithelial cell culture. Our group has experimented with human cord blood serum which was obtained free of cost from willing donors. The use of human cord blood serum in place of fetal bovine serum for ex vivo culture of limbal stem cell has helped us in reducing the cost of culture. Fresh human limbal tissues from donor cadavers were cultured on intact and denuded amniotic membrane. Cells were proliferated in vitro with cell culture media containing human cord blood serum. Reverse transcription-polymerase chain reaction and immunofluorescence cytochemistry of cultured human limbal epithelial stem cell was done for characterization of the cells.

PMID: 24596943